肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）检测试剂盒(荧光PCR法)
试剂简介：
检测目标
特异性检测**肠炎沙门氏菌（Salmonella Enteritidis, SE）**的核酸片段（如保守基因invA、sefA或prot6E）。
可区分其他沙门氏菌血清型（如S. Typhimurium）或相近肠道病原菌。
产品名称 | 肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1524 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法原理
荧光定量PCR（qPCR）：通过特异性引物和TaqMan探针扩增SE靶基因，实时监测荧光信号，实现高灵敏度（≤10 CFU/mL）和特异性检测。
适用样本
食品（肉类、蛋类、乳制品）、粪便、环境样本（饲料、水样）及临床分离株。
二、试剂盒组成
核心组分
PCR预混液：含热启动Taq酶、dNTPs、Mg2缓冲液。
引物探针混合液：针对SE特异性基因设计（如sefA）。
内标（IC）：监控提取与扩增效率，避免假阴性。
阳性对照（SE DNA）与阴性对照（无核酸水）。
辅助材料
DNA提取试剂（磁珠法/柱提法）、八联管、封膜等。
三、操作流程
样本前处理
增菌培养：食品样本需在缓冲蛋白胨水（BPW）或Rappaport-Vassiliadis培养基中增菌18-24小时。
DNA提取：取增菌液提取DNA，建议使用试剂盒配套提取方法。
PCR扩增
反应体系配制（示例：20μL体系）：
预混液15μL + 模板DNA 5μL。
扩增程序（两步法）：
预变性：95℃ 3分钟 → 循环阶段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环）。
结果分析
阳性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型（需排除引物二聚体干扰）。
阴性：无扩增曲线或Ct值>38（需结合内标判断是否有效）。
四、性能参数
指标 参数示例
灵敏度 1-10 CFU/反应（增菌后）
特异性 不与大肠杆菌、志贺氏菌等交叉反应
重复性 批内/批间CV≤5%
五、应用场景
食品安全监测：快速筛查食品中的SE污染，符合GB 4789.4等标准。
临床诊断：辅助腹泻病原体鉴别（需结合培养鉴定）。
养殖场防控：追踪禽类（如蛋鸡）沙门氏菌携带状态。
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关键字： 肠侵袭性大肠杆菌;检测试剂盒;荧光PCR法;
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