肠道腺病毒 / 人星状病毒 / 札如病毒检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 )
试剂简介：
检测目标
肠道腺病毒（AdV）：血清型40/41为主，儿童急性胃肠炎常见病原体。
人星状病毒（HAstV）：分8个基因型（HAstV-1至8），与免疫力低下人群腹泻相关。
札如病毒（SaV）：杯状病毒科，GⅠ-GⅤ基因型，冬季高发。
产品名称 | 肠道腺病毒 / 人星状病毒 / 札如病毒检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1530 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
技术原理
双重荧光PCR：
AdV：FAM标记探针靶向Hexon基因保守区。
HAstV/SaV：HEX/VIC标记探针靶向ORF1/ORF2连接区（SaV）或RdRp基因（HAstV）。
内控系统：Cy5标记的人源RNase P基因，监控样本质量与提取效率。
二、试剂盒组成与样本处理
1. 核心组分
组分 说明
核酸提取试剂 磁珠法全流程试剂（含载体RNA，提升低载量样本回收率）。
PCR预混液 含HotStart Taq酶、dUTP/UNG防污染系统，支持粗提样本直接扩增。
引物探针混合液 AdV-FAM、HAstV-HEX、SaV-VIC三通道探针，兼容主流qPCR仪（ABI 7500等）。
对照品 阳性对照（AdV41/HAstV-4/SaV-GⅡ重组质粒）、阴性对照（无核酸水）。
2. 样本要求
适用样本：粪便（推荐10%悬液）、肛拭子、呕吐物（需离心去渣）。
保存条件：4℃保存≤72小时，-80℃长期保存（避免反复冻融）。
三、操作流程（四步法）
1. 核酸提取
粪便处理：取100mg加1mL PBS均质，离心取上清，按磁珠法提取（20分钟完成）。
质控标准：A260/A280比值1.7-2.0，浓度≥5 ng/μL。
2. PCR体系配制
反应体系（25μL）：
预混液12.5μL + 引物探针混合液2μL + 模板5μL + 无核酸酶水5.5μL
循环程序：
50℃ 2分钟（UNG活化）→ 95℃ 10分钟 → 45循环（95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟，三通道采集荧光）。
3. 结果判读
结果类型 AdV（FAM）
阳性 Ct≤35
可疑 35<Ct≤38
阴性 Ct≥40
四、临床意义与局限性
1. 临床应用
儿科腹泻病原筛查：快速区分病毒性/细菌性感染，避免抗生素滥用。
暴发调查：适用于托幼机构、养老院等聚集性腹泻事件溯源。
2. 局限性
亚型覆盖：无法区分AdV血清型40/41以外的亚型（需测序）。
抑制物干扰：粪便中胆汁盐可能抑制PCR，建议稀释复测。
五、注意事项（2025年更新）
防污染设计：
采用dUTP/UNG系统降解既往产物，实验分区严格（样本处理→PCR配制→扩增分析）。
最新优化：
部分试剂盒新增CRISPR-Cas13a辅助检测，灵敏度提升至1拷贝/反应（适用于极低载量样本）。
公司正在出售的产品：
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关键字： 肠道腺病毒 ;检测试剂盒;双重荧光PCR法;
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