产气荚膜梭菌（CP）检测试剂盒（荧光PCR法）
试剂简介：
一、试剂盒核心信息
检测目标
特异性检测**产气荚膜梭菌（CP）**的毒力基因：
α毒素基因（plc）：所有CP菌株保守标记。
β毒素基因（cpb）：B/C型菌株（致坏死性肠炎）。
ε毒素基因（etx）：B/D型菌株（动物致病型）。
可扩展检测肠毒素基因（cpe）（食物中毒关联株）。
产品名称 | 产气荚膜梭菌（CP）检测试剂盒（荧光PCR法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1547 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法原理
多重荧光PCR：
单管同步检测1-4种靶基因（如FAM/HEX/Cy5/ROX通道）。
采用TaqMan-MGB探针，提高野生株与变异株的匹配度。
适用样本
粪便（人类/动物腹泻）、食物（肉类/乳制品）、环境样本（土壤/饲料）。
二、试剂盒组分与操作流程
1. 核心组分
组分 功能说明
PCR预混液 含抗抑制剂聚合酶、dUTP/UNG防污染系统（防扩增产物残留）。
引物探针混合液 plc-FAM/cpb-HEX/etx-Cy5/cpe-ROX（按检测需求配置）。
内标（IC） 人工合成DNA（VIC通道），监控提取与扩增。
阳性对照 灭活CP标准株（ATCC 13124，含plc+cpe）。
2. 操作步骤
样本前处理：
粪便：1:10稀释后煮沸10分钟破壁（或商业DNA提取试剂）。
食物：需增菌（RCM肉汤，37℃厌氧培养8-12小时）。
PCR程序（25μL体系）：
50℃ 2min（UNG消化）→ 95℃ 10min → [95℃ 15s → 60℃ 1min]×40 cycles
三、性能与结果解读
1. 关键参数
指标 性能要求
灵敏度 102 CFU/g（直接样本）
特异性 不与艰难梭菌、产芽孢梭菌交叉
检出限 1-10拷贝/反应（纯DNA）
2. 结果判读
分型示例：
plc+cpe阳性：食物中毒风险株（A型）。
plc+cpb阳性：动物致病株（B/C型）。
无效检测：内标无扩增（需排查采样或抑制剂干扰）。
四、注意事项
采样与运输
粪便需厌氧保存（含巯基乙酸钠培养基），常温运输≤24小时。
局限性
无法区分产毒活性（需结合培养与细胞毒性试验）。
生物安全
实验后需121℃高压灭菌（CP芽孢耐热性强）。
五、应用场景
临床诊断：急性坏死性肠炎（儿童/动物）的病原筛查。
食品安全：肉类加工链的污染监测（如即食食品）。
兽医领域：羔羊痢疾、仔猪坏死性肠炎的快速分型。
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关键字： 产气荚膜梭菌;检测试剂盒;荧光PCR法;
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