传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

传染性胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae, APP）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于检测猪传染性胸膜肺炎病原体的分子诊断工具。该试剂盒利用实时荧光定量PCR技术，能够快速、准确地检测样本中的APP核酸，是养猪场疫病防控和临床诊断的重要手段。

1. 检测原理

该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），通常采用TaqMan探针法。

靶标基因： 针对APP基因组中的保守毒力基因设计特异性引物和探针。常见的靶标基因包括：

apxIVA基因： 该基因是APP种特异性的毒力基因，常用于特异性检测。

16S rRNA基因： 作为细菌通用内参，用于监控样本中是否存在抑制物或提取失败。

反应机制： 试剂盒通常采用双重荧光PCR，FAM通道检测apxIVA基因（目标病原），HEX/VIC通道检测16S rRNA（内参）。若样本中存在APP核酸，探针会被水解并释放荧光信号，仪器通过监测荧光信号的扩增（Ct值）来判断结果。

2. 产品特点

高特异性： 引物和探针经过优化，能特异性识别APP，通常不会与副猪嗜血杆菌、猪链球菌等其他猪呼吸道病原体发生交叉反应。

高灵敏度： 最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL，能够检测到极低浓度的病原体，优于传统的细菌分离培养法。

快速高效： 整个检测过程（包括DNA提取和PCR扩增）通常在 2小时 左右完成，远快于细菌培养法（需3-7天）。

操作简便： 市售试剂盒通常提供预混好的PCR Mix，操作简便，减少了配液误差和污染风险。

3. 主要用途

临床辅助诊断： 用于检测疑似感染猪的肺脏组织、气管拭子、鼻拭子或扁桃体样本，辅助确诊APP感染。

疫情监测与净化： 用于猪场的定期监测，评估生物安全措施效果，建立无特定病原体猪群。

鉴别诊断： 用于与其他引起猪呼吸道症状的疾病（如猪繁殖与呼吸综合征、猪流感）进行鉴别诊断。

4. 储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶混合液）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融，有效期通常为12个月。

样本类型： 主要用于检测组织样本（肺、扁桃体）、拭子样本（鼻腔、气管）或全血。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读（参考值）：

阳性： FAM通道扩增曲线呈典型“S”型，且Ct值 < 38。

可疑： Ct值在 38-40 之间，建议复测。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值 ≥ 40。

无效： 阳性对照未扩增或内参未扩增，提示实验失败，需重做。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。