韭菜子探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 韭菜子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Allii Tuberosi Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5069 |
预期用途
用于韭菜子核酸的定性检测，适用于科研用途，不适用于临床诊断。
检验原理
采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对韭菜子基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶切割探针释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。
试剂组成
扩增体系组分：
预混缓冲液（含dNTPs、Mg²⁺等）
Taq DNA聚合酶
韭菜子特异性引物及探针混合液
对照品：
阳性质控品（人工合成DNA片段，1×10⁸拷贝/μL）
阴性质控品（无核酸酶水）
其他：说明书1份。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
运输条件：低温避光运输，建议使用冰袋（2~8℃）。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等），需配备FAM检测通道。
样本要求
样本类型：植物组织、种子提取物等。
核酸提取：推荐使用柱式DNA提取试剂盒，避免RNA污染。提取后DNA应保存于-20℃（短期）或-70℃（长期）。
操作步骤
试剂配制：
将预混液解冻后涡旋混匀，按N+2（样本数+阴阳对照）分装至PCR管。
每管加入5μL模板DNA（样本/对照）。
PCR程序：
预变性：95℃ 3min
扩增循环（40次）：95℃ 15s → 55-60℃ 30s（采集荧光）
数据分析：
阳性判定：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
可疑样本：35<Ct<40，需复测确认。
注意事项
实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。
不同批号试剂不可混用，阴性质控品应无扩增信号（Ct≥40）。
本产品仅限科研使用，严禁用于临床诊断。
质量控制
阳性质控品Ct值需≤30，阴性质控品无扩增。
标准曲线相关系数（R²）应≥0.98，否则需重新实验。
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