金银花探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 金银花探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Flos Lonicerae Japonicae Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5074 |
技术原理
采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通过特异性探针（5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团）与靶序列结合，在Taq酶作用下释放荧光信号，实现高灵敏度、高特异性的核酸定量检测。
产品特点
高特异性：引物及探针针对金银花保守序列设计，与近缘物种无交叉反应。
高灵敏度：最低检测限达10~100拷贝/μL，可检测低至10ng的DNA模板。
快速便捷：预混试剂即开即用，全程约3小时，含阳性对照（1×10^8拷贝/μL）。
防污染设计：含dUTP/UNG酶系统（部分型号），降低假阳性风险。
多重检测兼容：支持双重或三重PCR体系（视型号而定）。
试剂盒组成
探针法qPCR缓冲液
荧光定量PCR酶混合液（含Taq DNA聚合酶、逆转录酶等）
金银花特异性引物及探针混合液
阳性对照（1×10^8拷贝/μL）
模板稀释液
说明书
操作步骤
样本制备：提取待测样本DNA，建议使用柱式提取试剂盒。
标准曲线稀释：将阳性对照按10倍梯度稀释（10^2~10^7拷贝/μL）。
反应体系配制（20μL/反应）：
qPCR缓冲液：10μL
酶混合液：2μL
引物探针混合液：3μL
模板DNA：5μL
PCR程序：
逆转录（若需）：50℃ 30 min
预变性：94℃ 10 min
扩增（40循环）：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM通道信号）
数据分析
定量分析：以标准曲线Ct值计算模板浓度。
定性判定：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30；待测样本Ct≤35判为阳性。
注意事项
分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照需最后加入，防止污染其他组分。
探针避光保存，反复冻融不超过3次。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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