产品原理
基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用探针法检测：
探针设计：5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过荧光强度变化定量分析目标序列。
检测流程：包括反转录（RNA→cDNA）、PCR扩增、实时荧光检测三步骤。
产品名称 | 南沙参探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Adenophorae Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5027 |
产品特点
高灵敏度与特异性：引物及探针针对南沙参高度保守区设计，避免交叉反应。
即开即用：仅需提供样品RNA模板，预混缓冲液、酶、引物及探针。
双用途：支持定性和定量检测（线性范围：10E1~10E7拷贝/μL）。
质控完善：含阳性对照（无传染性DNA片段）及阴性对照，排除假阴性。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL |
| 南沙参qRT-PCR引物混合液 | 100μL |
| 南沙参qRT-PCR探针 | 50μL |
| 阳性对照（1×10E8拷贝/μL） | 50μL |
| 说明书 | 1份 |
操作步骤
标准曲线制备（6个梯度稀释）
标记离心管（6~1号），每管加45μL稀释液。
依次稀释阳性对照（10倍梯度，10E7~10E2拷贝/μL），冰上保存。
RNA提取
建议设置N+2样本（含阳性/阴性对照），使用兼容的RNA提取试剂盒。
qRT-PCR反应（20μL体系）
按比例加入缓冲液、酶、探针、引物及模板（样品/标准品/对照）。
反应程序：
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
40循环：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性检测：
阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35或≤36。
灰区（35~40或36~40）：需重复检测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。
防污染措施：使用带芯枪头、一次性手套，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，反应液避光保存，避免气泡。
声明
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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关键字： 南沙参;探针法;PCR鉴定试剂盒;
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