鹅星状病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鹅星状病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Goose Astrovirus Type 1 Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5273 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，特异性检测鹅星状病毒1型（GAstV-1）核酸，适用于科研用途（如病毒流行病学研究、实验室检测），不适用于临床诊断。
检验原理
靶标设计：针对GAstV-1高度保守基因区域设计特异性引物及探针。
荧光信号：探针在PCR扩增过程中水解释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量/定性分析。
灵敏度：检测下限达100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。
对照设置：提供无传染性人工合成DNA片段作为阳性对照，避免假阴性干扰。
试剂盒组成
| 组分 | 规格 |
| GAstV扩增液 | 25μL×1管 |
| GAstV反应液 | 975μL×1管 |
| 阳性质控品（DNA标准品） | 50μL×1管（10^7拷贝/μL） |
| 阴性质控品（无核酸酶水） | 50μL×1管 |
| 说明书 | 1份 |
自备材料
样本DNA提取试剂（推荐商品化病毒基因组DNA提取试剂盒）。
无核酸酶离心管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、荧光定量PCR仪（兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流机型）。
样本要求
适用样本：鹅肠道组织、粪便、血清、呼吸道分泌物等。
保存与运输：短期-20℃保存，长期-70℃；运输需2-8℃冰袋，避免反复冻融。
操作步骤
样本DNA提取：按提取试剂盒说明书操作，建议设置阴性/阳性提取对照。
标准曲线制备（定量分析需选）：
将阳性对照按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），独立分区操作避免污染。
PCR反应体系配制（20μL/反应）：
混合19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液 + 5μL模板DNA。
扩增程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 荧光采集 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 | 否 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 | 否 |
| | 55℃ | 30 sec | | 是 |
结果判读
阳性：Ct值≤35.0，且扩增曲线呈典型指数增长。
可疑：35.0<Ct值≤38.0，需重复检测确认。
阴性：无Ct值或扩增曲线无显著上升。
注意事项
分区操作：试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。
质控要求：每批次实验需包含阴/阳性质控品，若对照结果异常则实验无效。
废弃物处理：实验后所有耗材需经121℃高压灭菌30分钟后再丢弃。
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