产品概述
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于猫疱疹病毒1型（FHV-1）核酸的定性与定量检测。FHV-1是猫病毒性鼻气管炎（FVR）的主要病原体，可引发上呼吸道感染、结膜炎等临床症状。本试剂盒通过特异性探针与引物设计，实现对FHV-1基因组保守区域的高灵敏度检测，适用于科研及临床辅助诊断。
产品名称 | 猫疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Feline Herpesvirus Type 1 Probe-based Real-time PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5234 |
技术原理
探针法qPCR：
针对FHV-1保守序列设计引物及TaqMan探针，探针5'端标记FAM荧光基团，3'端标记淬灭基团。
PCR扩增时，Taq DNA聚合酶切割探针，释放荧光信号，通过实时监测荧光强度计算Ct值，定量病毒拷贝数。
标准曲线定量：
配套阳性对照（无传染性DNA片段）提供6个梯度稀释标准品（10^1~10^6拷贝/μL），用于绘制标准曲线，确保定量准确性。
试剂盒组成
| 组分 | 规格/数量 | 功能说明 |
| 2×Probe qPCR预混液 | 500μL~1mL | 含Hot Start Taq酶、dNTPs、缓冲液 |
| FHV-1引物-探针混合液 | 50T~100μL | 特异性扩增目标序列 |
| 阳性对照 | 50μL（10^7~10^8拷贝/μL） | 标准曲线制备及质控 |
| 模板稀释液 | 1mL | 稀释阳性对照或溶解DNA模板 |
| 核酸释放剂（选配） | 2.5mL | 快速裂解样本，免DNA提取步骤 |
操作流程
样本处理：
适用样本：眼/鼻咽拭子、组织匀浆、抗凝全血。
核酸提取：推荐使用离心柱法或配套核酸释放剂。
反应体系配制（20μL/反应）：
预混液19μL + 酶液1μL + 模板DNA 5μL。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 10min → 扩增（45循环）：95℃ 15s → 60℃ 1min（采集FAM信号）
结果判读：
定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性（需复测临界值）。
定量：通过标准曲线计算病毒载量（拷贝数/μL）。
性能参数
灵敏度：最低检测限≤500拷贝/反应。
特异性：不与猫杯状病毒（FCV）、衣原体等交叉反应。
重复性：批内/批间变异系数（CV）<5%。
注意事项
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。
防污染措施：
严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）。
使用带滤芯枪头及UNG酶防污染体系（部分型号）。
局限性：
基因突变可能导致假阴性；样本质量影响检测准确性。
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