MKN-45-eGFP-LUC;人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记
商品属性
产品名称 | MKN-45-eGFP-LUC;人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记 | 英文名称 | MKN-45-eGFP-LUC |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 半贴壁/半悬浮 |
货号 | P-X11338 | 细胞生长 | 多形型 |
母系来源 MKN-45 (人胃癌细胞)
标记基因 eGFP (绿色荧光蛋白) + LUC (荧光素酶)
抗性基因 通常携带 Puro (嘌呤霉素) 抗性
物种来源 人 (Homo sapiens)
组织来源 胃淋巴结转移灶(印戒细胞癌)
细胞形态 多形型
生长特性 半贴壁/半悬浮 (需收集悬浮细胞)
培养基 RPMI-1640 + 10% FBS
细胞背景与核心特性
母系来源与病理背景
MKN-45 细胞系由 S. Akiyama 于 1985 年建立,源自一位 35岁女性胃癌患者的淋巴结转移灶(病理类型为印戒细胞癌)。
它属于低分化胃腺癌模型,具有高度恶性特征,常用于研究胃癌的侵袭和转移机制。
注意:该细胞系 HPV 检测阴性,且不表达 EB 病毒相关抗原。
核心特性(双标记优势)
eGFP (绿色荧光蛋白):
用途:用于体外检测。在荧光显微镜下可直接观察细胞形态、定位及分选(流式细胞术)。
优势:实时、无损、无需染色。
LUC (荧光素酶):
用途:用于体内及体外定量。注入底物(D-luciferin)后产生生物发光。
优势:活体成像。可实时、定量监测裸鼠体内肿瘤的生长、转移及药物治疗后的肿瘤负荷变化,灵敏度极高。
双重验证:eGFP 用于定性观察,LUC 用于精确定量,两者结合可提供最可靠的实验数据。
科研应用价值
原位移植瘤模型:利用其高侵袭性,构建胃癌原位模型,实时监测肿瘤在胃壁的生长及腹膜、肝脏转移。
药物筛选与评价:利用荧光/发光信号快速评估药物(如化疗药、靶向药、纳米药物)的体内外疗效。
转移机制研究:结合活体成像,实时追踪癌细胞的播散路径。
细胞特性
来源:人细胞系MKN-45,经基因工程改造,稳定表达增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和荧光素酶(LUC),适用于活体成像、肿瘤转移追踪及药物筛选研究。
标记特性:
eGFP:可通过荧光显微镜直接观察细胞定位与分布。
LUC:需注射荧光素底物(如D-荧光素),通过生物发光成像系统检测信号强度。
安全性:需在二级生物安全柜中操作,废液及接触器皿需高压灭菌处理。
培养条件
培养基:90% RPMI-1640 + 10%胎牛血清,补充0.1 μg/mL嘌呤霉素(维持筛选压力)。
培养环境:37℃、5% CO₂,悬浮生长。
传代方法:
细胞未长满时,更换新鲜培养基继续培养;
细胞长满后,离心重悬分瓶(建议传代比例1:2至1:3)。
质量控制
STR鉴定:提供STR分型报告,确保细胞株唯一性。
无菌检测:支原体、细菌、真菌检测均为阴性。
注意事项
需定期检测标记基因表达稳定性,避免长时间培养导致信号衰减。
活体实验需遵守动物伦理规范,荧光素底物注射剂量需优化。
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