荧光素酶/GFP标记的人原髓细胞白血病细胞;HL-60-Luc-GFP
产品信息：
HL-60-Luc-GFP 是在经典的人急性早幼粒细胞白血病细胞系 HL-60 的基础上，通过基因工程手段同时标记了荧光素酶（Luciferase）和绿色荧光蛋白（GFP）的双标记细胞系。
这种细胞结合了 HL-60 原有的生物学特性与双报告基因的优势，使其在活体成像、细胞示踪、药物筛选及免疫学研究中具有极高的应用价值。
产品名称 | 荧光素酶/GFP标记的人原髓细胞白血病细胞;HL-60-Luc-GFP | 英文名称 | HL-60-Luc-GFP：HL60LucGFP |
货号 | AXB10546 | 生长特性 | 贴壁生长 |
1. 细胞背景与基本特性
母细胞来源：源自一名 36 岁女性急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的外周血。
标记方式：通过慢病毒转染或质粒转染，稳定整合 Luc 和 GFP 基因。
GFP（绿色荧光蛋白）：在荧光显微镜下可直接观察细胞形态和分布（激发波长 ～488 nm，发射波长 ～507 nm）。
Luc（荧光素酶）：用于活体成像（IVIS），通过注射底物 D-Luciferin 后检测生物发光信号，定量监测细胞在动物体内的增殖和分布。
关键遗传特征：与母细胞 HL-60 一样，该细胞系缺乏 t(15;17) 易位，PML-RARα 融合基因阴性（这与 NB4 细胞系不同）。
核心参数速览
特征 描述
形态 圆形或卵圆形（髓系早幼粒细胞样）
生长特性 悬浮生长（不贴壁）
生物安全等级 BSL-1 / BSL-2 (涉及基因修饰建议按二级操作)
倍增时间 约 24-36 小时
主要应用 白血病机制研究、活体示踪、药物筛选、吞噬/免疫功能研究
详细培养操作指南
HL-60-Luc-GFP 的培养核心在于维持悬浮状态和防止分化。
基础培养条件
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：饱和湿度
推荐培养基配方
注：IMDM 通常更适合造血细胞，能提供更优的生长状态。
血清：20% 胎牛血清 (FBS)（HL-60 对血清质量较敏感，建议使用优质血清）。
双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
特殊添加：部分培养方案建议添加 1% L-谷氨酰胺。
传代与换液操作 (关键步骤)
由于是悬浮细胞，操作需轻柔，避免剧烈震荡导致细胞膜损伤。
观察密度：每天观察。正常细胞应呈单个分散或小团簇悬浮。
活细胞：折光性强、透亮、细胞膜完整。
死细胞：边缘模糊、有毛发影、或细胞碎片多。
传代时机：当细胞密度达到 8×10 ～ 1×10 cells/mL 时需传代。
传代方法：
离心法（推荐）：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm (约 100-200g) 离心 3-5 分钟。弃上清，用新鲜预热的培养基重悬沉淀，按 1:2 至 1:4 的比例分装到新瓶。
直接分装法：若细胞状态极佳且密度极高，可直接将旧培养基（含细胞）吸出，按比例加入新瓶，再补足新鲜培养基。
换液频率：建议 2-3 次/周。
技巧：若细胞密度尚低但培养基变黄（pH下降），可采用“半换液法”（轻轻吸出一半旧液，补充一半新液），减少对细胞的刺激。
HL-60-Luc-GFP 的特殊应用优势
免疫学与功能研究
HL-60 细胞具有吞噬功能和趋化反应。
示踪吞噬：利用 GFP 的绿色荧光，可以直接在荧光显微镜下观察细胞对荧光微球或病原体的吞噬过程。
活性氧（ROS）检测：常用于研究免疫细胞的呼吸爆发。
药物筛选与分化研究
分化诱导：可用 ATRA (全反式维甲酸) 或 DMSO 诱导其分化为粒细胞或单核细胞。
双报告基因验证：
GFP 用于在显微镜下观察分化后的形态变化（如伪足形成）。
Luc 用于在药物处理过程中定量检测细胞活力（ATP 检测或活体成像）。
活体成像 (IVIS)
由于标记了 Luc，可构建白血病荷瘤鼠模型，实时监测白血病细胞在小鼠体内的浸润、扩散及药物治疗后的细胞清除情况。
注意事项与常见问题
防止分化（非常重要）：
DMSO 是分化诱导剂。如果复苏时使用含 DMSO 的冻存液，复苏后必须立即离心去除 DMSO，否则细胞会停止增殖并开始分化。
密度过高：细胞密度过高（>1×10）会自发分化，导致形态改变和功能丧失，务必及时传代。
抱团现象：HL-60 容易抱团。少量抱团属正常，但如果大量抱团且中间有死细胞，说明细胞状态不佳。吹打时要轻柔，尽量吹散团块。
支原体检测：悬浮细胞易受支原体污染，建议定期检测，支原体污染会严重影响实验结果。
基因稳定性：长期培养后，Luc 和 GFP 的表达可能会减弱。建议在 -80℃ 或液氮中多备几管早期代次的细胞（P20 以内），并定期通过流式细胞术检测 GFP 阳性率。
公司正在出售的产品：
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注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： HL-60-Luc-GFP;荧光素酶/GFP标记的人原髓细胞白血病细;贴壁细胞;
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