荧光素酶/GFP标记的人肺腺癌细胞;NCI-H1975-Luc-GFP
产品信息：
1. 细胞背景与基本特性
母细胞来源：NCI-H1975 细胞建系于一位 82 岁白人女性非吸烟者的肺腺癌组织。
标记方式：通过慢病毒转导，稳定整合 Luc 和 GFP 基因（通常带有嘌呤霉素抗性基因 Puro）。
关键遗传特征：
EGFR 突变：携带 L858R 激活突变和 T790M 耐药突变。这使得它对第一代 EGFR-TKI 药物（如吉非替尼）天然耐药，是研究第三代 TKI 药物（如奥希替尼）的理想模型。
KRAS 状态：KRAS 基因野生型。
双报告基因特性：
GFP：在荧光显微镜下呈绿色，可用于直观观察细胞形态、纯度鉴定及流式分选。
Luc：用于活体成像，通过注射底物 D-Luciferin 后检测生物发光信号，定量监测细胞在动物体内的成瘤和转移情况。
产品名称 | 荧光素酶/GFP标记的人肺腺癌细胞;NCI-H1975-Luc-GFP | 英文名称 | NCI-H1975-Luc-GFP：NCIH1975LucGFP |
货号 | AXB10596 | 生长特性 | 贴壁生长 |
核心参数速览
特征 描述
形态 上皮细胞样（多边形）
生长特性 贴壁生长
倍增时间 约 24-30 小时
生物安全等级 BSL-1
主要应用 肺癌耐药研究、活体成像、药物筛选
详细培养操作指南
NCI-H1975-Luc-GFP 的培养相对稳健，通常使用 RPMI-1640 培养基。
基础培养条件
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：饱和湿度
推荐培养基配方
基础培养基：RPMI-1640。
血清：10% 胎牛血清 (FBS)。
双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
特殊添加（针对 Luc/GFP 标记）：
嘌呤霉素 (Puromycin)：建议添加 1-10 μg/mL 的嘌呤霉素进行筛选，以维持荧光素酶和 GFP 基因的稳定表达（具体浓度需参考说明书）。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)
弃液：吸去旧的培养上清液。
润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。
消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1-2 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。
观察：在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，进行下一步。
终止：加入含血清的完全培养基终止消化。
离心：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm (约 100-200g) 离心 3-5 分钟。
重悬与分装：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，按 1:2 至 1:4 的比例分装到新的培养瓶中。
冻存与复苏
冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。
复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。
注意事项与常见问题
运输中的脱落（常见问题）：
NCI-H1975 细胞在运输过程中非常容易因震动而脱落。收到细胞后，如果发现瓶底有漂浮的细胞团，请不要直接丢弃。
处理方法：将培养基转移至离心管，离心（1000 rpm, 5 min）收集脱落细胞，用 PBS 重悬清洗一次，然后加入胰酶消化 20 秒左右，再用完全培养基终止并重悬，重新接种回培养瓶中。
荧光信号衰减：
随着传代次数的增加，外源基因可能会发生沉默，导致荧光素酶或 GFP 表达减弱。
对策：定期使用嘌呤霉素进行筛选；实验前进行荧光显微镜拍照和活体成像验证。
运输培养基：
收到细胞后，运输用的培养基通常不再适合继续培养，请务必离心去除，并用新鲜配制的完全培养基重悬接种。
支原体检测：
作为基因修饰细胞系，建议定期检测支原体，确保实验数据的准确性。
总结：NCI-H1975-Luc-GFP 是一款贴壁生长的非小细胞肺癌工具细胞。它不仅保留了经典的 EGFR 耐药突变特征，还赋予了双模态示踪能力（GFP 用于显微镜观察，Luc 用于活体定量）。培养时请重点关注细胞是否脱落，并维持抗生素筛选压力。
公司正在出售的产品：
Anti-KLF8 KLF样转录因子8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | Phospho-CD18 (Ser756 + Thr758 + Thr759) 英文名称： 0酸化整合素β2/Integrin β2抗体 0.1ml |
phospho-MEK1 (Ser298) 英文名称： 0酸化原活化蛋白激酶激酶1抗体 0.1ml | Phospho-PDGFRA(Tyr754) 英文名称： 0酸化血小板源性生长因子受体-α抗体 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG 小鼠抗IgG 规格 1mg | AR(Human androgen receptor) ELISA Kit 人雄激素受体 |
Anti-PSA 鼠抗人特异性抗原单克隆抗体(检测)Multi-class antibodies规格： 0.2ml | Beta crystallin S 英文名称： γS-crystallin蛋白抗体 0.2ml |
Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(C端)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Anti-MMP-1/FITC 荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
ADV IgG XI 腺病毒 IgG Ⅺ型(间接法二步法) | Anti-CHK1 细胞周期检测点激酶1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又称：纤维介素蛋白;前凝血素) 0.5mg | Rhesus antibody Rh CKLFH3/CMTM3 趋化素样因子超家族成员3抗体 规格 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-KCNC1(Ser503) 0酸化离子通道蛋白Kv3.1抗体 规格 0.1ml | Anti-FGF5 纤维母细胞生长因子5抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色体抗体 | 荧光素酶/GFP标记的人肺腺癌细胞;NCI-H1975-Luc-GFPHIV gp41 病毒(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5ml |
GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-0酸甘油醛脱氢酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg | Cyclin B2 英文名称： 周期素B2抗体 0.1ml |
注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： NCI-H1975-Luc-GFP;荧光素酶/GFP标记的人肺腺癌细胞;贴壁细胞;
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一家领先的化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商， 我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药，生物技术，化工/石化行业等具商业规模的企业。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)除包括化学、分析化学、生命科学和材料科学阿凡提(affandi)产品线外。 质量是所有产品和服务最关键的组成部分，我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一个值得信赖的，以服务为导向的公司。产品质量是我们的立身之本， 但提供给客户的远不止产品本身，现货库存、包装、应急反应、客户的技术支持等等因素能满足和超越您的期望对我们是同样重要的。我们建立的质量管理流程保证 了高水准的服务和不断追求完美的承诺。对于大多数目录产品库存，可保证当天或第一时间发货，我们也逐渐建立一支业务精炼、服务周到的客服队伍，把满足客户的 需求作为自己的工作宗旨，运用各种方式来满足客户的需求，服务渗透到售前、售中、售后，甚至延伸产品本身之外，我们争取做到出售的不再是简单的产品，而是服务。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、 华东师范大学、第二军医大学、南京大学，暨南大学，南京工业大学，曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。
本公司可为您提供科研ELISA试剂盒，种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒； 另有针对各种动物（鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼）的科研试剂。