荧光素酶标记的人乳腺癌细胞;MDA-MB-468-Luc
产品信息：
细胞基本特性
来源背景： MDA-MB-468 细胞于 1977 年由 R. Cailleau 分离建立，取材于一位 54岁女性 的乳腺腺癌组织。
标记方式： 稳定表达萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）。
生长特性： 贴壁生长。
细胞形态： 上皮细胞样。
分子分型： 基底样型（Basal-like），三阴性乳腺癌（TNBC） 模型（ER/PR 阴性，HER2 低表达）。
特殊性质： 该细胞系具有表皮生长因子受体（EGFR） 的基因扩增和过表达，且 p53 基因突变。这使得它成为研究 EGFR 靶向治疗和 p53 相关信号通路的理想模型。
STR 鉴定： 经过 STR 鉴定正确，保证了细胞系的纯度和身份。
产品名称 | 荧光素酶标记的人乳腺癌细胞;MDA-MB-468-Luc | 英文名称 | MDA-MB-468-Luc：MDAMB468Luc |
货号 | AXB10558 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养条件与完全培养基配置
MDA-MB-468 细胞有一个非常显著的特点，那就是它对 CO 的耐受性与其他细胞不同。
基础培养基： Leibovitz's L-15 (L15) 培养基。
注意：这是该细胞最常用的培养基，因为它不含碳酸氢钠缓冲系统，不需要 CO 培养箱。
添加成分：
胎牛血清 (FBS)： 10%
双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%
培养环境：
气相： 空气 100%（不需要 CO）。
温度： 37℃。
替代方案： 如果你必须使用 RPMI-1640 或 DMEM 等含碳酸氢钠的培养基，则必须添加 NaHCO 并使用 5% CO 培养箱，但 L-15 是其最适培养基。
详细培养操作指南
细胞复苏
快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1 分钟内完全融化。
离心洗涤： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液转移至含 4-5 mL 预热完全培养基的离心管中，混匀。1000 rpm 离心 3-5 分钟。
重悬接种： 弃去上清，加入适量完全培养基（L-15 + 10% FBS）重悬细胞，接种到 T25 培养瓶中。
静置观察： 次日观察细胞贴壁情况，通常不需要换液，继续培养即可。
细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）
弃液洗涤： 弃去旧培养基，用不含钙镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
消化： 加入适量 0.25% 胰蛋白酶（含或不含 EDTA），以覆盖瓶底为宜。放入 37℃ 培养箱消化 1-3 分钟。
注意：该细胞贴壁较牢，消化时间可能比普通细胞稍长。
终止消化： 显微镜下观察，当细胞大部分变圆、间隙变大时，加入含血清的培养基终止消化。
离心分瓶： 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清，用新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。
细胞冻存
收集： 按传代步骤收集处于对数生长期的细胞。
计数： 离心洗涤后，用冻存液重悬。
冻存液： 推荐使用 90% 完全培养基 + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。
程序降温： 将冻存管放入程序降温盒，然后转移至 -80℃冰箱，24 小时后转入 液氮罐 长期保存。
关键注意事项（必读）
荧光素酶的维持（重要）：
为了维持细胞的发光强度，很多 MDA-MB-468-Luc 细胞系在培养过程中需要添加 嘌呤霉素（Puromycin） 进行筛选。
具体浓度需参考供应商说明书（通常筛选浓度为 2-10 μg/mL）。如果不加抗生素，随着传代次数增加，发光强度可能会逐渐减弱。
特殊的气体环境：
这是最容易出错的地方。L-15 培养基不需要 CO。如果你的实验室没有全空气培养箱，可以使用透气性差的密封盖培养瓶，并每天在超净台中打开瓶盖换气 1-2 次，以维持 pH 值稳定。
生长速度：
MDA-MB-468 细胞的生长速度属于中等偏慢，倍增时间较长（约 40-50 小时甚至更久）。请耐心观察，不要频繁换液打扰细胞。
活体成像应用：
由于该细胞是三阴性且 EGFR 高表达，结合 Luc 标记，它非常适合用于三阴性乳腺癌的靶向治疗和免疫治疗的活体药效评价。
总结
MDA-MB-468-Luc 是一个非常适合研究三阴性乳腺癌（TNBC） 和 EGFR 信号通路 的工具。它的核心难点在于L-15 培养基的使用和全空气环境的控制。只要掌握好这两点，并定期进行抗生素筛选，它就能为你提供稳定、可靠的发光信号，助力你的肿瘤研究。
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注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
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