产品信息：
1. 细胞基本档案
特征维度 详细信息
亲本来源 人 Burkitt's 淋巴瘤细胞 (Daudi)
标记基因 荧光素酶 (LUC) + 增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)
筛选抗性 嘌呤霉素 (Puromycin)
产品名称 | 人Burkitt's淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Daudi-LUC-eGFP-puro | 英文名称 | Daudi-LUC-eGFP-puro：DaudiLUCeGFPpuro |
货号 | AXB10669 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
生物安全等级 BSL-2
病毒携带 携带 EB 病毒 (EBV)
核心特性与应用
双重报告基因：
eGFP (绿色荧光)： 激发波长 488nm，发射波长 510nm。用于显微镜下实时观察细胞位置和形态，或通过流式细胞术进行分选。
LUC (荧光素酶)： 用于生物发光成像 (BLI)。注射荧光素底物后，可通过 IVIS 等活体成像系统定量检测细胞在小鼠体内的分布和肿瘤负荷。
药物筛选： puro (嘌呤霉素抗性) 基因允许你在培养基中添加嘌呤霉素，以维持质粒的稳定表达，防止标记基因丢失。
应用领域： 肿瘤移植模型构建（特别是裸鼠模型）、CAR-T 细胞杀伤实验、药物体内分布及疗效评价。
培养操作手册
基础培养条件
基础培养基： RPMI-1640 培养基。
血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。
添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。
特殊添加 (关键)： 为了维持 LUC 和 eGFP 的稳定表达，建议在完全培养基中添加 嘌呤霉素 (Puromycin)。具体浓度需参考构建该细胞系的说明书（通常为 1-4 μg/mL）。
环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。
传代操作 (关键步骤)
Daudi 细胞是悬浮细胞，不需要胰酶消化。
观察： 镜下观察细胞密度。正常的 Daudi 细胞应为圆形、折光性强、边缘清晰。注意观察 eGFP 的绿色荧光强度。
离心： 将培养瓶中的细胞悬液直接转移至离心管中，1000 rpm (约 100-150g) 离心 3-5 分钟。
弃上清： 小心吸弃上清液（不要吸到沉淀）。
重悬： 加入新鲜预热的完全培养基（含 Puromycin），轻轻吹打混匀。
分瓶： 按 1:2 至 1:4 的比例分装到新瓶中。
注意： Daudi 细胞在密度较高时（>2×10 cells/mL）容易发生堆积或死亡，建议勤换液、勤传代。
收货处理
干冰运输（冻存管）：
收到后立即转入液氮或 -80℃ 保存，或直接复苏。
复苏后建议先在不含 Puromycin 的培养基中培养 24-48 小时，让细胞恢复状态，再换用含 Puromycin 的筛选培养基。
常温运输（T25瓶）：
收到后用 75% 酒精消毒瓶壁，放入培养箱静置 2-3 小时。
镜下观察：若细胞沉淀在瓶底，需将培养基离心（1000rpm, 5min），弃上清，用 PBS 重悬后重新接种到含新鲜培养基的瓶中。
特别注意事项
荧光淬灭： eGFP 荧光虽然稳定，但长时间暴露在强光下会淬灭。观察完后请尽快将细胞放回培养箱。
支原体检测： 基因修饰细胞对支原体污染非常敏感，且支原体可能影响荧光表达，建议定期检测。
无菌操作： 由于该细胞携带 EB 病毒，操作时请务必在 二级生物安全柜 内进行，并遵循良好的实验室规范。
冻存保护： 建议在细胞状态良好时（对数生长期）使用含 10% DMSO 和 90% 血清的冻存液进行程序性降温冻存。
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细胞类型与特性原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。
细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。
细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。
根据生长方式分为：
贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字： LUC+eGFPDaudi-LUC-e;人Burkitt's淋巴瘤细胞;贴壁细胞;
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