人淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puro
产品信息：
1. 细胞背景与基本特性
母本细胞：Raji (人Burkitt淋巴瘤细胞)
种属来源：人 (Homo sapiens)
组织来源：B淋巴细胞；源自一位11岁黑人男孩的左上颌骨Burkitt淋巴瘤。
产品名称 | 人淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puro | 英文名称 | Raji-LUC-eGFP-puro：RajiLUCeGFPpuro |
货号 | AXB10670 | 生长特性 | 贴壁生长 |
标记基因：
LUC：荧光素酶，可用于生物发光成像（需底物荧光素）。
eGFP：绿色荧光蛋白，可在荧光显微镜下直接观察（Ex/Em = 488/507 nm）。
Puro：嘌呤霉素抗性，用于维持筛选压力，确保标记基因的稳定表达。
病毒特征：EB病毒（EBV）阳性。
生物安全等级：BSL-2（建议在二级生物安全柜内操作）。
核心参数速览
特征 描述
培养基 RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
生长状态 悬浮生长 (圆形，单个或团簇)
传代比例 1:2 ～ 1:5
倍增时间 约 24-36 小时
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液
详细培养操作指南
Raji 细胞属于淋巴瘤细胞，对机械损伤和环境变化相对敏感，且容易聚团。
基础培养条件
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：饱和湿度（70%-80%）
推荐培养基配方
基础培养基：RPMI-1640。
血清：10% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质血清）。
双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
筛选抗生素：嘌呤霉素 (Puromycin)。
注意：为了维持 LUC 和 eGFP 的表达，建议在培养基中持续添加适量的嘌呤霉素（具体浓度需参考构建时的筛选浓度，通常为 1-10 μg/mL）。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 或细胞浓度过高时)
Raji 细胞是悬浮细胞，无需胰酶消化。
观察：在显微镜下观察细胞密度和活率。细胞呈圆形，单个或聚集成团。
收集：将培养瓶中的细胞悬液直接转移至离心管中。
离心：1000 rpm (约 200-300g) 离心 5 分钟。
弃上清：小心吸去上清液。
重悬：加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。
分装：按 1:2 至 1:5 的比例分装到新瓶中。
技巧： 如果细胞聚团严重，可轻轻吹打将其吹散，但不要过度用力以免损伤细胞膜。
冻存与复苏
冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。
复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。
注意事项与常见问题
运输中的脱落（常见问题）：
悬浮细胞在运输途中极易因震动而分散。收到细胞后，如果直接观察瓶底无明显细胞沉淀，请务必先颠倒混匀或离心运输培养基，切勿直接丢弃。
细胞聚团：
Raji 细胞容易形成大的细胞团块。少量聚团是正常的，但如果团块过大，可能会导致中心细胞缺氧死亡。建议传代时轻轻吹散细胞团。
荧光观察：
eGFP：在荧光显微镜的 GFP 通道下观察，细胞应呈现明亮的绿色荧光。
LUC：需加入底物（D-luciferin）后通过化学发光仪或 IVIS 成像系统检测。
培养基颜色变化：
悬浮细胞代谢较快，需密切观察培养基颜色（pH值）。若培养基迅速变黄（酸化），说明细胞密度过大或代谢废物积累，需及时换液或传代。
公司正在出售的产品：
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注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： LUC+eGFPRaji-LUC-eG;人淋巴瘤细胞;贴壁细胞;
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