变形杆菌属检测试剂盒
试剂简介:
检测目标:特异性检测变形杆菌属(包括常见致病种如 奇异变形杆菌(P. mirabilis) 和 普通变形杆菌(P. vulgaris)),该菌属是尿路感染、伤口感染和医院获得性肺炎的常见病原体。
产品名称 | 变形杆菌属检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1581 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法原理:基于荧光定量PCR,靶向变形杆菌属的保守基因(如尿素酶基因(ureC)或16S rRNA基因),通过FAM通道检测,搭配内参基因(如人类β-actin,HEX通道)监控样本质量。
适用样本:尿液(尿路感染)、伤口拭子、痰液(呼吸道感染)、食品和环境样本(如生肉、水体)。
2. 检测流程
样本处理
尿液/痰液:离心取沉淀,重悬于PBS。
伤口拭子:置于无菌生理盐水中震荡洗脱。
食品样本:需均质化后增菌培养(如SCDLP肉汤,37℃ 18-24h)。
DNA提取
推荐磁珠法或柱式法(如QIAamp DNA Mini Kit),避免多糖类抑制物干扰。
PCR扩增
反应体系:
引物探针:靶向ureC(FAM),内参(HEX)。
循环程序:95℃ 3min →(95℃ 15s → 60℃ 45s)×45循环。
结果判读
阳性:Ct≤35(FAM),且内参Ct≤30(临床样本)。
可疑:35<Ct<38,建议复测或测序确认。
3. 性能参数
指标 参数要求
灵敏度 ≤50 CFU/反应(纯培养)
特异性 不与大肠杆菌、克雷伯菌交叉
检出限 10^3 CFU/mL(尿液样本)
抗干扰性 耐受10%血液或黏液成分
4. 注意事项
假阳性风险:
环境中普遍存在变形杆菌,需结合临床判断是否为致病菌。
食品样本可能含死菌,建议结合培养法验证活性。
生物安全:操作需在BSL-2实验室进行,避免气溶胶污染。
质控要求:每批次含阴性对照(无菌水)、阳性对照(含ureC质粒)。
5. 应用场景
临床诊断:复杂性尿路感染(如导管相关感染)的病原鉴定。
食品安全:生鲜肉类加工链的卫生监测。
医院感染控制:ICU环境(如呼吸机管路)的污染筛查。
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