检测目标:特异性检测白色念珠菌(Candida albicans, CAN),一种常见的条件致病性真菌,可导致口腔/阴道念珠菌病、侵袭性念珠菌血症等。
方法原理:基于荧光定量PCR,靶向CAN的保守基因 (如ERG11或ITS2区域),通过FAM通道检测,搭配内参基因(如人类β-globin,HEX通道)监控样本质量。
适用样本:口腔拭子、阴道分泌物、血液培养物、组织活检(深部感染)。
2. 检测流程

样本处理
黏膜拭子:置于无菌生理盐水中震荡洗脱,离心取沉淀。
血液样本:阳性血培养瓶取1 mL,裂解红细胞后提取DNA。
组织样本:液氮研磨后蛋白酶K消化(56℃ 2h)。
DNA提取
推荐酵母细胞壁破壁试剂(如Lyticase预处理)+磁珠法提取(如DNeasy Blood & Tissue Kit)。
PCR扩增
反应体系:
引物探针:ERG11(FAM)、内参(HEX)。
循环程序:95℃ 3min →(95℃ 15s → 60℃ 45s)×45循环。
结果判读
阳性:Ct≤35(FAM),且内参Ct≤30(临床样本)。
混合感染:若需检测其他念珠菌(如光滑念珠菌),需使用多重PCR试剂盒。
3. 性能参数

指标 参数要求
灵敏度 ≤10 CFU/反应(纯培养)
特异性 不与近平滑/热带念珠菌交叉
检出限 10^2 CFU/mL(血液样本)
抗干扰性 耐受10%血液或黏液成分
4. 注意事项

假阴性风险:
真菌细胞壁厚,需充分破壁(建议机械研磨+酶处理)。
抗真菌药物(如氟康唑)治疗后,死菌DNA可能残留导致假阳性。
生物安全:操作需在BSL-2实验室进行,深部感染样本需加强防护。
质控要求:每批次含阴性对照(无菌水)、阳性对照(CAN ATCC 90028)。
5. 应用场景

临床诊断:
免疫抑制患者(如HIV/AIDS)的口咽/食管念珠菌病快速确诊。
血流感染(念珠菌血症)的早期病原鉴定。
耐药监测:结合ERG11测序检测唑类耐药突变(如Y132F)。
公司正在出售的产品