巴尔通体检测试剂盒(荧光 PCR 法)
一、检测原理：
荧光PCR法基于TaqMan探针技术，通过特异性引物和荧光标记探针扩增巴尔通体的靶基因（如**16S rRNA、gltA（柠檬酸合成酶基因）、ITS（内转录间隔区）**等），实时监测荧光信号，实现定量或定性检测。
产品名称 | 巴尔通体检测试剂盒(荧光 PCR 法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1605 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
关键组分
引物探针：针对巴尔通体保守序列设计，如：
B. henselae（汉赛巴尔通体）
B. quintana（五日热巴尔通体）
B. bacilliformis（杆菌状巴尔通体）
酶系统：热启动Taq DNA聚合酶+逆转录酶（若检测RNA）
内参对照：监测样本提取及扩增效率（如人β-actin）
二、适用样本类型
样本类型 适用性 采集要求
全血（EDTA抗凝） 最佳（尤其慢性感染） 2-5 mL，4℃保存（<24h）
组织活检（淋巴结、心内膜） 确诊感染部位 无菌采集，-80℃冻存
脑脊液（CSF） 神经型巴尔通体病 ≥1 mL，避免反复冻融
血清/血浆 抗体检测更优，PCR灵敏度较低 分离后-20℃保存
三、操作流程
1. 核酸提取
推荐磁珠法/柱提法（如QIAamp DNA Mini Kit）
避免使用肝素抗凝管（抑制PCR）
2. PCR反应体系配制
组分 体积（μL） 作用
2×PCR Mix 10 提供dNTPs、Mg2、缓冲液
引物（10μM） 0.5-1.0 特异性扩增
探针（5μM） 0.5 荧光信号释放
模板DNA 2-5 检测靶序列
ddHO 补至20 调整体积
3. 扩增程序
步骤 温度 时间 循环数
预变性 95℃ 3 min 1
变性 95℃ 15 sec 40
退火/延伸 60℃ 1 min
4. 结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型
可疑：Ct值35-40，建议重复检测
阴性：无扩增信号
四、性能参数
指标 参数
灵敏度 10-100 拷贝/μL
特异性 >98%（无交叉反应）
检测限（LOD） 50-100 CFU/mL
检测时间 2-3小时
五、临床意义
早期诊断：比血清学检测（如IFA、ELISA）更早发现感染
鉴别诊断：区分巴尔通体与其他发热性疾病（如Q热、莱姆病）
疗效监测：抗生素治疗后PCR转阴提示治疗有效
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