人B淋巴细胞瘤细胞+luc;RAMOS-LUC-PURO
产品信息：
细胞基本档案
特征维度 详细信息
亲本来源 人 B 淋巴瘤细胞 (RAMOS)
标记基因 荧光素酶 (LUC)
筛选抗性 嘌呤霉素 (Puromycin)
生长特性 悬浮生长
细胞形态 淋巴母细胞样 (圆形)
组织来源 血液/淋巴组织
病毒状态 EBV 阴性
产品名称 | 人B淋巴细胞瘤细胞+luc;RAMOS-LUC-PURO | 英文名称 | RAMOS-LUC-PURO：RAMOSLUCPURO |
货号 | AXB10684 | 生长特性 | 贴壁生长 |
核心特性与应用
双重报告系统：
LUC (荧光素酶)： 用于生物发光成像。你可以在小鼠体内实时监测肿瘤负荷、药物疗效及肿瘤转移情况。
Puro (嘌呤霉素)： 用于维持质粒的稳定表达。通过添加嘌呤霉素，可以筛选出高表达 LUC 的细胞群，防止传代过程中荧光信号丢失。
B 细胞特性： 该细胞表达 IL-4 受体、低亲和性 IgE 受体 (CD23)，并分泌 IgM，常用于研究 B 细胞活化、分化及信号转导。
应用领域： 抗淋巴瘤药物筛选、CAR-T 细胞杀伤实验、活体肿瘤成像模型构建。
3. 培养操作手册
基础培养条件
基础培养基： RPMI-1640 培养基。
血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。
添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。
筛选压力 (关键)： 为了维持 LUC 基因的稳定高表达，建议在培养基中添加 嘌呤霉素 (Puromycin)。
推荐浓度： 通常为 0.5 - 2 μg/mL（具体浓度请参考你所购买细胞的说明书）。如果不加压，长期传代可能导致荧光素酶表达减弱。
环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。
传代操作 (关键步骤)
RAMOS-LUC 是悬浮细胞，不需要胰酶消化。
观察： 镜下观察细胞密度。细胞应为圆形、折光性强、边缘清晰。
离心： 将细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm (约 100-150g) 离心 3-5 分钟。
弃上清： 小心吸弃上清液（不要吸到沉淀）。
重悬： 加入新鲜预热的完全培养基（含 Puromycin），轻轻吹打混匀。
分瓶： 按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。
注意： 细胞密度建议维持在 1×10 - 1×10 cells/mL 之间。RAMOS 细胞生长较快，建议隔天观察，密度高了要及时传代。
收货处理
常温运输（T25瓶）：
收到后用 75% 酒精消毒瓶壁，放入培养箱静置 2-4 小时。
重点： RAMOS 细胞在运输途中容易因震荡而脱落（如果是贴壁状态发货）或沉淀。若发现细胞沉淀，需离心收集并重悬，确认活性后再进行培养。
干冰运输（冻存管）：
37℃水浴快速复苏，离心重悬后接种。
复苏初期建议在不含 Puromycin 的培养基中培养 24 小时，让细胞恢复状态，随后换用含 Puromycin 的筛选培养基。
4. 特别注意事项
荧光素酶活性： 在进行体内成像实验前，建议先在体外验证荧光素酶的活性，确保细胞发光能力正常。
支原体检测： 悬浮细胞极易受支原体污染，且支原体可能影响荧光素酶的表达，建议定期检测。
细胞聚团： 淋巴瘤细胞容易聚团。如果团块过大，可用巴氏吸管轻轻吹打分散，或通过细胞筛过滤。
生物安全： 该细胞为人源肿瘤细胞，需在二级生物安全柜内操作。
总结
RAMOS-LUC-PURO = RAMOS 细胞 + 活体成像 (LUC) + 稳定筛选 (Puro)。
它是连接体外细胞实验与体内药效评价的桥梁。
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细胞具体特点如下：
环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字： RAMOS-LUC-PURO;人B淋巴细胞瘤细胞+luc;贴壁细胞;
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