产品信息：
这是一份关于T47D-LUC-PURO 人乳腺癌细胞（荧光素酶标记）的详细说明及标准培养操作指南。
T47D 是乳腺癌研究中常用的细胞系，而 T47D-LUC-PURO 是在其基础上通过基因工程手段稳定表达了荧光素酶（Luciferase, LUC）和嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因的改造株。该细胞系结合了 T47D 细胞的生物学特性和 LUC 的示踪能力，广泛应用于乳腺癌的活体成像、药物疗效评估及转移机制研究。
产品名称 | 人乳腺癌细胞+LUC;T47D-LUC-PURO | 英文名称 | T47D-LUC-PURO：T47DLUCPURO |
货号 | AXB10687 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
亲本来源：T47D (人乳腺导管癌细胞)
种属来源：人（Homo sapiens）
组织来源：乳腺导管癌（Ductal carcinoma）
供体信息：54岁女性
细胞形态：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
标记基因：
LUC：荧光素酶，用于生物发光成像（需底物荧光素）。
PURO：嘌呤霉素抗性，用于筛选和维持质粒。
培养基：DMEM (高糖) + 10% FBS
细胞特性与应用
特征维度 详细描述
背景简介 T47D 细胞来源于一位 54 岁女性乳腺导管癌患者的胸腔积液，具有类固醇激素受体（如雌激素受体 ER+）。
荧光特性 该细胞通常不表达自发荧光蛋白（如 GFP），仅表达荧光素酶。因此在普通显微镜下无自发荧光，需通过生物发光成像（IVIS）检测。
抗性维持 培养基中通常需要添加 Puromycin (嘌呤霉素) 以维持荧光素酶标记的稳定表达。
主要应用 1. 乳腺癌肿瘤生长及药物干预的活体成像研究。
2. 乳腺癌转移及定植机制研究。
3. 抗肿瘤药物的体内/体外药效评价。
推荐培养体系
基础培养基：DMEM (高糖，High Glucose)
血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)
双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)
筛选压力：Puromycin (嘌呤霉素)（通常添加浓度为 1-2 μg/mL，具体需根据预实验确定，用于维持质粒不丢失）
培养环境：
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：维持培养箱内湿度 >90%。
详细培养操作指南
1. 细胞复苏 (Thawing)
预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。
解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。
转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。
稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。
离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。
接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含 Puromycin）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。
2. 细胞传代 (Passage)
T47D-LUC-PURO 为贴壁细胞。
观察：当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。
清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。
消化：加入适量消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA，约 1-2 mL），37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。
镜下观察：显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台。
终止：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。
离心：1000 rpm 离心 4-5 分钟。
重悬与分瓶：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 到 1:3 的比例进行分瓶传代。
3. 细胞冻存 (Freezing)
状态选择：待细胞生长状态良好时进行冻存。
消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化，待细胞变圆脱落。
收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。
离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。
重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。
分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。
关键注意事项
贴壁较弱：T47D 细胞贴壁相对较弱，消化时间不宜过长，吹打要轻柔，否则容易成片脱落导致细胞损伤。
运输脱落：在运输过程中，部分细胞可能会从瓶壁脱落。若收到细胞发现瓶底有漂浮细胞团，属正常现象。请将瓶内液体转移至离心管，离心收集细胞，弃上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培养基重悬后接种回培养瓶中。
抗性维持：为了维持 LUC 标记的稳定性，建议在培养基中持续添加 Puromycin。若长期不加压，荧光信号可能会随传代次数增加而减弱。
无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。
支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。
公司正在出售的产品：
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不同类型细胞的特异性（生物特性差异）
不同类型细胞的特异性（生物特性差异）
形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。
关键字： T47D-LUC-PURO;人乳腺癌细胞+LUC;贴壁细胞;
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