产品信息:

1. 细胞基本特性与背景
亲本来源: 源自人骨肉瘤细胞 MG63(该细胞系源自一名14岁患有骨肉瘤的白人男性)。
标记基因:
LUC: 萤火虫荧光素酶,用于生物发光检测。
Puro: 嘌呤霉素抗性基因,用于筛选和维持质粒稳定性。
细胞类型: 肿瘤细胞(骨肉瘤细胞)。
生长特性: 贴壁生长。
细胞形态: 成纤维细胞样(长梭形)。
应用领域: 仅限科研使用,主要用于骨肉瘤机制研究、抗肿瘤药物筛选及活体成像。
产品名称 | 人骨肉瘤细胞+LUC;MG63-LUC-PURO | 英文名称 | MG63-LUC-PURO:MG63LUCPURO |
货号 | AXB10694 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
2. 培养条件与完全培养基配置

MG63-LUC-PURO 细胞的培养条件通常沿用 MG63 细胞的培养条件。
基础培养基: MEM (Minimum Essential Medium)。
添加成分:
胎牛血清 (FBS): 10%。
双抗 (Penicillin-Streptomycin): 1%。
非必需氨基酸(NEAA): 1%(MEM培养基的常规添加剂)。
嘌呤霉素 (Puromycin): 0.5 - 1.0 μg/mL(用于维持筛选压力,防止荧光素酶基因丢失。具体浓度请参考供应商说明书,通常维持在0.5 μg/mL即可)。
培养环境:
温度: 37℃。
气相: 5% CO,95% 空气。
湿度: 饱和湿度。
3. 详细培养操作指南

细胞复苏
快速解冻: 将冻存管从液氮中取出,迅速放入 37℃水浴 中,轻轻摇晃,使其在 1 分钟内完全融化。
稀释离心: 用酒精消毒管壁,将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。1000 rpm 离心 3-5 分钟。
重悬接种: 弃去上清,加入含嘌呤霉素的完全培养基重悬细胞,接种到 T25 培养瓶中。
静置培养: 次日观察细胞贴壁情况,建议更换新鲜培养基以去除残留的 DMSO。
细胞传代(当细胞密度达 80%-90% 时)
弃液洗涤: 弃去旧培养基,用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
消化: 加入 0.25% 胰蛋白酶(Trypsin-EDTA,约 1-2 mL),放入 37℃ 培养箱消化 1-3 分钟。
注意:MG63 细胞贴壁较牢,需在显微镜下观察,待细胞间隙变大、变圆脱落时进行下一步。
终止消化: 加入含血清的培养基终止消化。
离心分瓶: 将细胞悬液转移至离心管,1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清,加入新鲜完全培养基重悬,按 1:2 至 1:3 的比例分装传代。
细胞冻存
收集: 按传代步骤收集处于对数生长期的细胞。
冻存液: 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO,或者专用的无血清冻存液。
程序降温: 将冻存管放入程序降温盒,置于 -80℃冰箱 过夜,第二天转入 液氮罐 长期保存。
4. 关键注意事项(必读)

荧光素酶表达稳定性(关键):
为了维持 LUC 的稳定表达,建议在平时的培养基中维持 低浓度的嘌呤霉素筛选。
如果发现荧光强度减弱,可以进行高浓度嘌呤霉素的短期筛选以富集阳性细胞。
贴壁较牢:
MG63 细胞属于贴壁非常牢固的细胞。传代时需要耐心等待胰酶发挥作用,切勿强行吹打,以免损伤细胞膜。
生长速度:
该细胞生长速度属于中等,倍增时间约为 28-38 小时。传代后通常需要 2-3 天才能长满。
生物安全等级:
属于 BSL-2 细胞,操作时需在生物安全柜中进行,并穿戴适当的防护装备。
总结
MG63-LUC-PURO 是研究骨肉瘤及进行活体成像的理想工具。培养它的核心在于控制消化时间(因为贴壁较牢)和维持抗生素筛选压力(以保证荧光素酶的持续表达)。只要掌握好这两点,它就能为你提供稳定的发光信号和可靠的实验数据。
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不同类型细胞的特异性(生物特性差异)

不同类型细胞的特异性(生物特性差异)
形态多样性:细胞形态因功能而异,如成纤维细胞呈梭形或多角形,神经细胞有突起,上皮细胞呈多边形紧密排列;细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性:动物细胞依赖线粒体供能,植物细胞具叶绿体进行光合作用;原核细胞(如细菌)无细胞核,真核细胞(如动植物细胞)有核膜包裹的核;某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖,哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性:贴壁细胞需附着表面生长(如成纤维细胞),悬浮细胞可在培养液中自由生长(如血液细胞);不同细胞分裂速度各异,如肿瘤细胞增殖较快,正常体细胞分裂较慢。
关键字: MG63-LUC-PURO;人骨肉瘤细胞+LUC;贴壁细胞;
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