人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PURO
产品信息:

1. 细胞背景与基本特性
母本细胞:U2OS (人骨肉瘤细胞)
种属来源:人 (Homo sapiens)
组织来源:骨(胫骨)
供体信息:源自一名 15 岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤。
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样(多边形,铺路石状)
产品名称 | 人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PURO | 英文名称 | U20S-LUC-PURO:U20SLUCPURO |
货号 | AXB10681 | 生长特性 | 贴壁生长 |
标记基因:
LUC:荧光素酶,可用于生物发光成像(需底物荧光素)。
PURO:嘌呤霉素抗性,用于维持筛选压力,确保标记基因的稳定表达。
应用领域:骨肉瘤机制研究、抗肿瘤药物筛选、裸鼠成瘤实验及转移灶示踪。
2. 核心参数速览

特征 描述
培养基 McCoy's 5A + 10% FBS
生长状态 贴壁生长 (上皮样)
传代比例 1:2 ~ 1:3
消化时间 1-2 分钟 (胰酶消化)
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 或专用冻存液
3. 详细培养操作指南

U20S-LUC-PURO 细胞的培养方式与普通 U2OS 细胞基本一致,主要区别在于培养基中需要添加筛选抗生素以维持荧光素酶的表达。
基础培养条件
温度:37℃
气体环境:95% 空气 + 5% CO
湿度:饱和湿度
推荐培养基配方
基础培养基:McCoy's 5A(这是 U2OS 细胞的标准培养基)。
血清:10% 胎牛血清 (FBS)。
双抗:1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
筛选抗生素:嘌呤霉素 (Puromycin)。
注意:为了防止报告基因丢失,建议在培养基中持续添加适量的嘌呤霉素。通常维持浓度为 0.5 - 1.0 μg/mL(具体浓度需参考构建时的筛选浓度)。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)
U2OS 细胞贴壁相对较牢,呈上皮样,需用胰酶消化。
弃液:吸去旧的培养上清液。
润洗:加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液,轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次,弃去 PBS。
消化:加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液(T25 瓶加 1 mL),置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。
注意:需在显微镜下观察,待细胞间隙变大、细胞大部分变圆并脱落时,立即终止消化。
终止:加入含血清的完全培养基终止消化。
离心与分装:将细胞悬液转移至离心管,1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清,重悬后按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。
冻存与复苏
冻存液:推荐使用 90% FBS + 10% DMSO,或专用的无血清冻存液。
复苏:37℃ 水浴快速摇晃解冻,立即转移至含完全培养基的离心管中混匀,离心去除上清(去除 DMSO),重悬后接种。
注意事项与常见问题

运输中的脱落(常见问题):
贴壁细胞在运输途中可能因震动导致部分或全部脱落。收到细胞后,如果发现瓶底无细胞或细胞极少,请务必离心运输培养基,将管底沉淀的细胞团块重悬接种,不要直接丢弃。
荧光素酶活性检测:
该细胞表达荧光素酶,可用于活体成像。在进行动物实验前,建议先在体外验证荧光素酶的表达活性(加入荧光素底物后检测发光值)。
筛选压力:
如果在培养过程中去除了嘌呤霉素(Puromycin),部分细胞可能会丢失 LUC 报告基因,导致荧光信号减弱。建议在实验对照组中保持抗生素筛选。
细胞密度监控:
U2OS 细胞在低密度下生长可能较慢,建议保持适当的密度传代。
公司正在出售的产品:
Anti-phospho-P53 (Ser20)/FITC 荧光素标记0酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | P70 Beta 2 英文名称: 核糖体S6蛋白激酶β2抗体 0.1ml |
Anti-CD97 CD97抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Calcitonin 人降钙素Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-GRB10/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠生长因子受体结合蛋白10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前体 |
Rhesus antibody Rh CSF3/G-CSF 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3抗体 规格 0.1ml | Bovine IgM (亲和化) IgM 1mg |
phospho-Kv4.2(Thr602) 英文名称: 0酸化电压门控性通道蛋白Kv4.2抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh BCHE(1E8) 丁酰胆碱酯酶单克隆抗体 规格 0.2ml |
AFA/snoRNP/U3RNP(Human anti-fibrillarin antibody) ELISA Kit 人抗核仁纤维蛋白抗体 | Anti-TEM8/FITC 荧光素标记内皮标志物8抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Anti-Jun B/FITC 荧光素标记活化蛋白激酶B抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh MID1/Midline-1/RNF59 环指蛋白59抗体 规格 0.2ml |
ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脱氢酶 | HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白90Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-Omgp /FITC 荧光素标记少突细胞髓0脂糖蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PUROATG3 英文名称: 自噬相关蛋白3抗体 0.1ml |
Anti-HDAC5/FITC 荧光素标记组蛋白去乙酰化酶5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-Melamine/FITC 荧光素标记抗三聚胺抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
细胞具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: U20S-LUC-PURO;人骨肉瘤细胞+LUC;贴壁细胞;
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