人恶性黑色素瘤细胞;A375-LUC-EGFP
商品属性
产品名称 | 人恶性黑色素瘤细胞;A375-LUC-EGFP | 英文名称 | A375-LUC-EGFP |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11324 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
背景特性:由A375细胞系经基因改造,稳定表达荧光素酶(LUC)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP),适用于活体成像、肿瘤转移及药物筛选研究。
生长特性:贴壁生长,遗传改造后具有无限增殖潜能,需定期检测基因稳定性。
纯度要求:细胞纯度≥90%,经检测不含HIV、HBV、HCV、支原体及细菌污染。
培养条件
培养基:DMEM(高糖)+ 10%胎牛血清(FBS)+ 1%青霉素-链霉素双抗。
培养环境:37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存。
细胞处理与传代
细胞复苏与接收
运输状态:冻存管(干冰运输)或贴壁培养瓶(灌满培养基密封)。
接收操作:
冻存细胞:37℃水浴快速复苏,离心后重悬接种。
贴壁细胞:75%酒精消毒瓶身,静置3-4小时稳定状态后观察。
质检要求:显微镜下拍照记录(40×、100×、200×),前3天状态为售后依据。
传代步骤(汇合度80%时进行)
弃旧培养基,PBS(无Ca²⁺/Mg²⁺)润洗1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶1-2ml,37℃消化1-2分钟(镜下观察细胞变圆后终止)。
加入新鲜培养基终止消化,轻柔吹打形成单细胞悬液。
按1:2至1:3比例分瓶,原培养基对比培养以评估适应性。
注意事项
稳定性监测:EGFP/LUC表达需定期验证(如荧光显微镜或流式细胞术)。
污染防控:严格无菌操作,建议使用原厂配套培养基减少适应性差异。
实验建议:传代后24小时内避免处理,确保细胞贴壁恢复。
应用提示
活体成像:接种裸鼠前需确认荧光素酶活性(如D-荧光素钾盐底物)。
文献参考:建议查阅ATCC或相关论文获取特定实验参数(如接种密度、药物处理浓度)。
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关键字: 人恶性黑色素瘤细胞;A375-LUC-EGFP;