糜蛋白酶(Chymotrypsin)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
糜蛋白酶,又称胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化,对脓性和非脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。
测定原理:
糜蛋白酶催化 ATEE 水解,产物在 237 nm有特征光吸收; 通过测定 237 nm 光吸收增加速率,来计算糜蛋白酶活性。
自备仪器和用品:
台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、冰和蒸馏水。测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30min ,调节波长到 237 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 37℃水浴中保温 30min。
3. 空白管:取微量石英比色皿/96 孔板,加入 20μL 试剂一,200μL 试剂二,混匀于 237nm 测定4min 内吸光值变化,记为△A 空白管。(从吸光值稳定增加开始计时)
4. 测定管:取微量石英比色皿/96 孔板,加入 20μL 粗酶液,200μL 试剂二,混匀于 237nm 测定4min 内吸光值变化,记为△A 测定管。(从吸光值稳定增加开始计时)
注 意:
空白管只需要测定一次。
上海酶联生物科技有限公司
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