酸性蛋白酶(ACP)测定试剂盒/分光光度法/48S
测定意义：
ACP 是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料。
测定原理：
酸性条件下，ACP 催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；钨蓝在 680nm 有特征吸收峰，通过测定其吸光度增加，来计算 ACP 活性。
自备仪器和用品：
水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、0.5 mL EP 管和蒸馏水。
测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min ，调节波长到 680 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二、试剂三和试剂四置于 30℃水浴保温30min。
3. 对照管：取 0.5 mL EP 管，加入 20μL 粗酶液，40μL 试剂二，混匀后置于 30℃水浴保温 10min；加入 40μL试剂三，混匀后 8000g ，4℃离心 10min；取 40μL 上清液，加入新的 EP 管，再加入 200μL 试剂四，40μL试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，680nm 测定光吸收，记为 A 对照管。
4. 测定管：取 0.5 mL EP 管，加入 20μL 粗酶液，40μL 试剂三，混匀后置于 30℃水浴保温 10min；加入 40μL试剂二，混匀后 8000g ，4℃离心 10min；取 40μL 上清液，加入新的 EP 管，再加入 200μL 试剂四，40μL试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，于 680nm 测定光吸收，记为 A 测定管。（注意与空白管不同，先加试剂三，后加试剂二）
5. 空白管：取 0.5 mL EP 管，加入 40μL 蒸馏水，200μL 试剂四，40μL 试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，于 680nm 测定光吸收，记为 A 空白管。
6. 标准管：取 0.5 mL EP 管，加入 40μL 标准品，200μL 试剂四，40μL 试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，于 680nm 测定光吸收，记为 A 标准管。
注 意：
1. 试剂一按操作指示配制，用多少配多少，出现白色絮状沉淀则不能用。
2. 临用前配制的试剂配置好后 3 天内使用完毕。
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