匙状细颈毛样线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 匙状细颈毛样线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Capillaria spiculigera Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3666 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发,专用于匙状细颈毛样线虫(Nematodirus spp.)的核酸检测,适用于科研用途,不可用于临床诊断。试剂盒具有高灵敏度、高特异性及操作简便的特点,支持定性和定量分析。
产品特点
即开即用:用户仅需提供纯化的DNA模板,无需额外优化引物或反应体系。
高特异性:引物针对匙状细颈毛样线虫保守序列设计,避免与其他病原体交叉反应。
灵敏度优异:检测下限可达数百拷贝/反应。
防污染设计:一管式闭管检测,减少气溶胶污染风险。
兼容性强:与主流核酸纯化方法及荧光定量PCR仪兼容。
规格与成分
试剂一:2×qPCR预混液(含染料),500 μL/管(棕色管)。
试剂二:荧光PCR专用模板稀释液,1 mL/管(黄盖)。
试剂三:匙状细颈毛样线虫特异性引物混合液,100 μL/管(白盖)。
阳性对照:无传染性DNA片段(浓度1×10^8拷贝/μL)。
反应次数:50次(20 μL/反应体系)。
存储与运输
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月(未开封)。
运输方式:低温干冰运输。
操作步骤
标准曲线制备(以10^2-10^7拷贝/μL为例):
使用阳性对照进行10倍梯度稀释(6个浓度点),稀释过程需在独立区域操作,避免污染。
每稀释步骤更换枪头,震荡混匀后冰上暂存。
样品DNA制备:
自选方法提取样本DNA,建议设置N+2个重复(含阳性对照和空白对照)。
PCR反应体系:
按20 μL体系配制:10 μL 2×预混液、2 μL引物混合液、2 μL模板DNA、6 μL无核酸酶水。
循环条件:95℃预变性5分钟;95℃ 15秒→60℃ 30秒(40个循环)。
数据分析:
定量检测时,以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。
注意事项
操作需在无菌环境下进行,避免交叉污染。
试剂解冻后需彻底混匀,避免反复冻融。
不同机型可能需自备10×ROX校正染料。
本产品仅限科研使用,不适用于临床或诊断目的。
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