寄生水霉染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 寄生水霉染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Saprolegnia parasitica Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3846 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供病毒样品，无需额外配制反应体系。
高特异性：根据寄生水霉保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应。
一管式检测：采用封闭式荧光定量PCR，避免后续污染。
适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
试剂盒成分
2×qPCR MagicMix（棕色管，500μL）
荧光PCR专用模板稀释液（黄盖，1 mL）
寄生水霉PCR引物混合物（白盖，100μL）
寄生水霉PCR阳性对照（红盖，1×10⁸ 拷贝/μL，50μL）
使用手册（1份）
实验步骤
DNA提取
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒提取样品DNA。
标准曲线制备（适用于定量检测）
将阳性对照按10倍梯度稀释（建议独立操作以避免污染），制备6个浓度梯度的标准品（10⁷至10²拷贝/μL）。
PCR反应体系配制
按20μL体系混合以下成分：
10μL 2×qPCR MagicMix
2μL 引物混合物
2μL 模板DNA
6μL 无核酸酶水
荧光定量PCR程序
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）
结果分析
荧光阈值设定：以反应前15个循环的荧光信号为本底，阈值设为标准偏差的10倍。
Ct值判读：根据标准曲线计算样品中寄生水霉的拷贝数。
注意事项
实验分区操作（样本制备区、PCR反应区），避免交叉污染。
阳性对照需单独稀释，严禁直接加入反应体系。
本产品仅限科研用途。
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