大鼠膀胱基质成纤维细胞

大鼠膀胱基质成纤维细胞

产品信息：

产品名称 大鼠膀胱基质成纤维细胞

组织来源 正常膀胱组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

膀胱是一个储尿器官。它是一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出。膀胱基质成纤维细胞作为膀胱上皮细胞的支持细胞，起着十分重要的作用。体外培养膀胱基质成纤维细胞不仅为组织工程膀胱，尿道提供种植细胞的必要手段，也是研究膀胱纤维化的基础与前提。

细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常膀胱组织。

2)细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：

大鼠膀胱基质成纤维细胞是存在于大鼠膀胱壁固有层中的成纤维细胞，呈梭形。它可合成和分泌胶原蛋白、蛋白多糖等细胞外基质，维持膀胱壁的结构稳定性和弹性，在膀胱损伤修复、膀胱炎症及膀胱纤维化过程中可被激活，参与膀胱壁的重构过程。
原代细胞实验要点：

一、取材与分离

新鲜、无菌：组织离体越快越好，全程冰上操作。

去除杂质：剔除脂肪、结缔组织、血污，减少污染和消化干扰。

温和消化：

控制酶浓度、温度、时间

及时终止消化，避免细胞过度损伤

过筛过滤：去除组织块，获得单细胞悬液。

二、接种与培养

密度关键：原代细胞普遍怕稀，密度太低不贴壁、不长。

完全贴壁后再换液：刚接种别乱动。

专用培养基：

内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基

血清质量影响极大，建议批次验证

CO₂、湿度、温度严格稳定，避免频繁开关门。

三、传代与冻存

不要等太满：汇合度 70%–80% 就传，不要等到堆积。

消化监控：镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。

冻存保护：

标准：90% 血清 + 10% DMSO

程序降温，尽快转入液氮

原代细胞冻存复苏能力弱，尽量早冻、多冻。

四、污染与状态判断

一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒：直接丢弃，不要救。

细胞状态好：

形态均一、轮廓清晰

生长均匀、无局部堆积

出现分化、拉长、多核、空泡多：说明老化 / 状态差，不建议继续实验。
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冻存复苏：

冻存的梯度降温：

逐步降温：细胞冻存时，先在4℃放置30分钟，再在-20℃放置1小时，随后转移至-80℃冰箱过夜，最后放入液氮长期保存，避免温度骤变导致细胞内冰晶形成。

标记清晰：冻存管上需标记细胞名称、代次、冻存日期和操作者姓名，避免后续复苏时混淆。

复苏的快速操作：

解冻后立即离心：细胞解冻后迅速转移至含预热培养基的离心管中，离心去除含DMSO的冻存液，减少DMSO对细胞的毒性。

复苏后静置培养：复苏后的细胞接种后，24小时内不要换液，让细胞有足够的时间恢复状态，24小时后再更换新鲜培养基。