大鼠肾间质成纤维细胞 新品

大鼠肾间质成纤维细胞

产品信息：

产品名称 大鼠肾间质成纤维细胞

组织来源 正常肾组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

肾间质是指肾脏血管和肾小管间的区域，为疏松的结缔组织构成，由间质细胞、网状纤维、少量弹力纤维、成纤维细胞核巨噬细胞等组成。

细胞特性

1) 组织来源于实验动物的正常肾组织。

2) 细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

推荐使用 delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
产品定义：

大鼠肾间质成纤维细胞是存在于大鼠肾脏间质中的成纤维细胞，主要分布于肾小管周围。它可合成和分泌胶原蛋白等细胞外基质，维持肾脏间质的结构稳定，在肾脏损伤时可被激活转化为肌成纤维细胞，大量分泌细胞外基质，参与肾间质纤维化的形成过程，是研究慢性肾脏病发病机制的重要细胞模型。
细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。