大鼠小肠成纤维细胞
产品信息：
产品名称 大鼠小肠成纤维细胞
组织来源 正常小肠组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat intestinal fibroblasts | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 长梭状细胞 | 货号 | P-X1563 |
细胞简介：
细胞详述
小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所，盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，全长约 5－6米，张开有半个篮球大，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。其管壁外围有结缔组织，这些结缔组织由成纤维细胞构成，对小肠起到支持和保护作用。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常小肠组织。
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：长梭状细胞，贴壁培养。
推荐培养基：
我们推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：
大鼠小肠成纤维细胞是存在于大鼠小肠壁间质中的成纤维细胞，主要分布于小肠黏膜下层和肌层之间。它可合成和分泌胶原蛋白等细胞外基质，维持小肠壁的结构稳定，同时可分泌细胞因子和生长因子，调节小肠上皮细胞的增殖和分化，参与小肠的损伤修复和炎症反应调节，是研究小肠功能障碍、炎症性肠病的重要细胞模型。
原代细胞传代：
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代，避免细胞过度汇合导致接触抑制，影响增殖能力
观察细胞状态：细胞形态正常，无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备：吸出旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞1-2次，去除血清（血清会抑制胰蛋白酶活性）
消化液选择：同原代分离，根据细胞类型选择合适的消化酶，胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟，胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止：显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，血清浓度不低于10%
细胞吹打：用移液器轻轻吹打细胞，避免过度用力导致细胞破裂，吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整：生长速度快的细胞（如成纤维细胞）可按1:3-1:6传代，生长速度慢的细胞（如内皮细胞、神经细胞）按1:2传代
首次传代比例可适当提高（如1:2），待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶，避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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收货与处理流程：
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有异常及时联系。
2. 细胞复苏（仅针对冻存细胞）
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化，时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀，1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液，补加1-2ml培养液吹匀，移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身，拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态后再进行后续操作
关键字： 大鼠小肠成纤维细胞;长梭状细胞;贴壁;
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