检验原理
本试剂盒采用SYBR Green I染料法实时荧光定量PCR技术,针对鲤疱疹病毒2型(CyHV-3)Sph基因高度保守区域设计特异性引物。在PCR扩增过程中,SYBR Green染料与双链DNA结合后释放荧光信号,通过实时监测荧光强度变化,实现对病毒核酸的定性和定量分析。
产品名称
鲤疱疹病毒2型染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Cyprinid Herpesvirus 2 (CyHV-2) Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3965
主要组分
PCR预混液(MagicMix 3.0):含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green I染料(1 mL,红盖);
超纯水(1 mL,亮黄色盖);
Sph基因特异性引物混合液(100 μL,白盖);
阳性对照(1×10^8 拷贝/μL,50 μL,黄盖);
核酸释放剂(试用装)(1 mL,绿盖,20次用量);
使用说明书(1份)。
储存与运输
-20℃避光保存,有效期12个月;运输需低温条件(冰袋或干冰)。阳性对照需单独存放,避免交叉污染。
操作步骤
样本处理:使用核酸释放剂提取待测样本DNA;
反应体系配制(40μL/反应):
PCR预混液 20 μL
引物混合液 2 μL
模板DNA 5 μL
超纯水补足至40 μL;
扩增程序(以ABI 7500为例):
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
结果判读:
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈典型S型;
阴性:无扩增曲线或Ct值≥40。
注意事项
本产品仅限科研使用;
避免反复冻融试剂;
实验需设置阳性对照和阴性对照;
操作需符合生物安全规范,防止气溶胶污染。
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