检验原理
本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对鲤疱疹病毒（KHV）保守基因区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性或定量检测。
产品名称 | 鲤疱疹病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cyprinid Herpesvirus Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3966 |
试剂组成
KHV扩增液：50μL ×1管
KHV反应液：950μL ×1管
KHV阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）：50μL ×1管
KHV阴性质控品：50μL ×1管
荧光PCR专用模板稀释液：1mL ×1瓶
说明书：1份
注意：不同批号试剂不可混用，组分数量满足标称检测次数。
储存条件及有效期
-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。
自备耗材
无DNA/RNA酶的1.5mL离心管、0.2mL PCR管
滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）
离心机、振荡器、移液器
样品要求
样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（参照《临床微生物样本采集规范》）。
保存条件：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月），运输需2~8℃冰袋。
使用方法
样品处理：按规范提取核酸，避免交叉污染。
阳性对照稀释：
将阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）按10倍梯度稀释至10^2~10^7拷贝/μL，用于标准曲线制备。
PCR反应体系：
每20μL反应体系含：2×qPCR MagicMix、引物混合物、模板DNA。
程序设置：
预变性：95℃ 5分钟；扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环），信号采集于延伸阶段。
数据分析
定量检测：以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算样品浓度。
定性检测：
阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。
样品Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35<Ct<40需复测。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作时需穿戴实验服、口罩及手套，避免污染。
阳性对照稀释需在独立区域进行，防止污染其他组分。
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关键字： 鲤疱疹病毒通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;