鳄鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

鳄鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本产品是专为检测鳄鱼源性成分设计的探针法荧光定量PCR试剂盒，采用实时荧光定量PCR技术，可对样品中的鳄鱼源性成分进行高灵敏度、高特异性的定性和定量检测。

产品特点

即开即用，用户只需提供样品DNA模板

引物和探针经过优化，灵敏度高，检测限可达10拷贝/μL

提供阳性对照，便于区分假阴性样品

特异性强，引物根据鳄鱼源性成分高度保守区设计，不会与其他物种DNA发生交叉反应

适用于50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应

本产品仅供科研使用

主要成分

探针法qPCR缓冲液（500μL）

探针法qPCR酶混合液（50μL）

荧光PCR专用模板稀释液（1mL）

鳄鱼源性成分PCR引物-探针混合液（50T）

PCR阳性对照（10^7拷贝/μL，50μL）

操作流程

标准曲线样品制备（以10^1-10^6拷贝/μL为例）

标记6个离心管，编号6至1

每管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液

在6号管中加入5μL阳性对照（10^7拷贝/μL），震荡混匀，得10^6拷贝/μL标准品

依次稀释至1号管，获得6个梯度标准品

样品DNA制备

建议设置N+2个提取（N个样品+阳性对照+阴性对照）

可采用常规DNA提取方法，试剂盒与多种商业DNA提取试剂兼容

PCR反应体系设置（20μL体系）

反应组分：

qPCR缓冲液：10μL

qPCR酶混合液：2μL

引物-探针混合液：2μL

模板DNA：5μL

无核酸酶水：1μL

反应程序：

预变性：95℃ 10分钟

PCR循环（40次）：

95℃ 15秒

60℃ 60秒（采集FAM通道信号）

结果分析

定量分析

以标准品浓度的log值为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线

根据样品Ct值计算待测样品浓度

定性分析

阴性对照Ct值≥40

阳性对照Ct值≤39且有典型扩增曲线

样品Ct值≤39判为阳性，≥40判为阴性

注意事项

操作需在不同区域进行，避免交叉污染

使用一次性耗材和专用工作服

反应液避光保存，避免反复冻融

实验后需对工作台和仪器进行消毒处理

所有废弃物应按生物安全规范处理

局限性说明

检测结果受样品采集、保存和处理方法影响

操作不当可能导致假阳性或假阴性结果

病原体基因变异可能导致假阴性

不同提取方法效率差异可能影响结果

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