阿拉斯加三文鱼细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 阿拉斯加三文鱼细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Alaskan Salmon Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4797 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR(qPCR)技术开发,专用于检测阿拉斯加三文鱼(Oncorhynchus keta)细胞基因组DNA残留。适用于科研领域,具有高灵敏度、高特异性及宽线性范围(5个数量级),可满足定性与定量分析需求。
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板。
高灵敏度:检测限低至100拷贝/反应,优化引物设计确保信号稳定性。
特异性强:靶向基因组DNA保守序列,避免与其他生物样本交叉反应。
质量控制:提供阳性对照(无传染性DNA片段),便于区分假阴性结果。
兼容性广:适配主流荧光定量PCR仪(如ABI、Bio-Rad、LightCycler等)。
组分清单
荧光定量PCR反应预混液(含探针、引物、dNTPs、酶等)
阳性对照(1×10^8拷贝/μL)
DEPC-H2O(阴性对照)
标准曲线稀释液(可选)
操作流程
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA,建议设置阴性对照(水)和阳性对照(试剂盒提供)。
2. 标准曲线制备(定量分析需选)
按10倍梯度稀释阳性对照(10^7~10^2拷贝/μL),独立操作避免污染。
标记离心管(1~6号),依次加入稀释液并混匀,冰上保存。
3. 反应体系配制(20μL/反应)
每管加入18μL预混液,分别加入2μL模板(待测样本、阴性对照、阳性对照)。
离心后立即上机。
4. PCR扩增程序
(具体程序需参考仪器说明书,典型条件如下)
预变性:95℃ 2分钟
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(采集荧光信号)
结果判读
定量分析:以阳性对照Ct值绘制标准曲线,计算样本拷贝数。
定性分析:
阳性:Ct值<35,S型扩增曲线。
阴性:Ct值>38或无信号。
可疑(35≤Ct≤38):需复检确认。
注意事项
分区操作:样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行,避免交叉污染。
试剂保存:-20℃避光保存,使用前充分混匀并短暂离心。
防污染措施:使用带滤芯枪头,实验后以10%次氯酸或75%乙醇清洁台面。
运输与有效期:低温运输,-20℃保存有效期12个月。
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关键字: 阿拉斯加三文鱼细胞基因组DNA残留;探针法荧光定量 ;PCR试剂盒;
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