产品原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用特异性探针与靶基因保守序列杂交，通过荧光信号积累实时监测扩增进程，实现对薤白（Bulbus allii macrostemonis）DNA的定性或定量检测。探针法具有高特异性，可有效避免非特异性扩增。
产品名称 | 薤白探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Bulbus Allii Macrostemi Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4935 |
产品特点
高特异性：引物及探针针对薤白高度保守区设计，经生物信息学验证，无交叉反应。
高灵敏度：最低检测限达10³拷贝/μL，无需预增菌。
即开即用：预混反应液含酶、dNTPs、缓冲液等，仅需加入模板DNA。
双重对照：提供阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性对照（水），确保结果可靠性。
应用范围：适用于组织、细胞、药材等样本的薤白成分鉴定及含量分析。
实验步骤
1. 样本制备
DNA提取：使用柱式法或试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
对照设置：
阳性对照：试剂盒提供的标准DNA片段（10⁷拷贝/μL，需梯度稀释）。
阴性对照：无核酸酶水。
2. 标准曲线制备（定量分析需选）
将阳性对照按10倍梯度稀释（10⁷~10²拷贝/μL），每个浓度重复3次。
3. qPCR反应体系（20μL）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× Probe Master Mix | 10 |
| 引物探针混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| 无核酸酶水 | 补足至20 |
4. 反应程序
预变性：95℃ 3分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集荧光），共40循环。
5. 数据分析
定量分析：根据标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析：Ct值≤36为阳性，≥40为阴性，36~40需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。
防污染措施：使用带滤芯枪头，实验台用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
试剂解冻：使用前充分混匀并短暂离心，避免反复冻融。
结果判读：阴性对照Ct值应≥40，阳性对照Ct值≤36且扩增曲线典型。
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