产品介绍:
核心技术参数与性能
检测原理:
普通PCR法: 通过特异性引物扩增BAV-3的保守基因片段(如预期产物长度约200bp),扩增产物需通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。
荧光定量PCR法(探针法/染料法): 利用TaqMan探针或SYBR Green染料,在PCR扩增过程中实时监测荧光信号,实现定量检测。
产品名称 | 牛腺病毒3型(BAV-3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3716 |
检测范围与灵敏度:
荧光定量法: 灵敏度极高,部分产品可达到几百拷贝/反应,线性范围通常覆盖5个数量级。
普通PCR法: 灵敏度相对较低,但足以满足常规定性检测需求。
特异性:
引物和探针通常针对BAV-3的DNA聚合酶基因(pol基因)或六邻体蛋白基因的保守区设计,与牛腺病毒其他血清型(如BAV-1, BAV-2)及其他牛呼吸道病原体(如BVDV, IBRV)无交叉反应。
3. 标准操作流程 (SOP) 关键点
样本类型:
适用标本: 病牛的鼻腔拭子、肺组织研磨液、肠内容物或牛血清/血浆。
核酸提取:
需自备病毒DNA提取试剂盒。BAV-3为双链DNA病毒,提取后可直接作为模板。
试剂配制与加样:
对照设置: 必须设置阴性对照(无菌水或阴性质控品)和阳性对照(试剂盒提供)。
反应体系: 通常为20μL体系(普通PCR)或25μL体系(荧光PCR)。
PCR扩增:
普通PCR程序(参考):
预变性:95℃ 5min
循环(35个):95℃ 30sec -> 55℃-60℃ 30sec -> 72℃ 30-60sec
延伸:72℃ 5min
荧光定量PCR程序(参考):
预变性:95℃ 10min
循环(40-45个):95℃ 15sec -> 60℃ 30-40sec(收集荧光)。
结果判定:
普通PCR: 电泳条带大小与阳性对照一致(约200bp)判为阳性。
荧光定量PCR: Ct值 ≤ 35-40 且扩增曲线呈“S”型判为阳性。
4. 采购与使用注意事项
储存条件: 大多数试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存,避免反复冻融(部分染料法试剂盒可能要求2-8℃保存,需仔细阅读说明书)。
有效期: 通常为 6个月 至 12个月。
普通PCR试剂盒: 需普通PCR仪 + 电泳系统。
荧光定量PCR试剂盒: 需荧光定量PCR仪(如ABI 7500, Bio-Rad CFX96等)。
仅限科研/检测: 绝大多数此类产品标注为“仅用于科研实验”或“兽医体外诊断”,严禁用于临床医疗或人用。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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FITC标记小鼠H-2K(D)/H2-D1单克隆抗体 | 错配修复蛋白2抗体 |
ZBTB9/ZNF919 锌指蛋白ZNF919抗体 | BCL2 like 14 Bcl2样凋亡蛋白14抗体 |
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人白介素26(IL-26)核酸检测试剂盒 | 猪免疫球蛋白M(IgM)PCR检测试剂盒 |
关键字: 牛腺病毒3型 ; BAV-3 ;核酸检测试剂盒;荧光PCR;
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