商品属性
产品名称 | 氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量测试盒 | 产品货号 | BH-961129 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 | 产品分类 | 谷胱甘肽系列 |
测试方法 | 微量法、可见分光光度法 | 用途 | 仅供科研实验 |
测定意义与原理
测定意义
谷胱甘肽（GSH）是哺乳动物细胞中最主要的低分子巯基化合物，在维持细胞氧化还原状态、保护蛋白质巯基免受氧化损伤、参与氨基酸转运、解毒和信号转导等多种生理过程中起着重要作用。生理情况下，约99%的谷胱甘肽以还原型（GSH）形式存在，仅1%为氧化型（GSSG），GSH/GSSG比值是反映细胞氧化应激状态的重要指标。
测定原理
GSSG在谷胱甘肽还原酶（GR）催化下，被NADPH还原为GSH： GSSG+NADPH+H+→GR2GSH+NADP+GSSG+NADPH+H+GR2GSH+NADP+ 生成的GSH与DTNB反应生成黄色产物TNB，TNB在412nm处有最大吸收峰，通过测定412nm处吸光度变化，计算GSSG含量。
自备仪器与试剂
必备仪器
可见分光光度计/酶标仪（412nm检测通道）
低温离心机（≥12000rpm）
恒温水浴锅（控温精度±0.5℃）
可调式移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）
研钵/组织匀浆器（冰浴专用）
必备耗材
1mL玻璃比色皿/96孔板
离心管（1.5mL、10mL）
一次性无菌吸头
手术剪/镊子（用于组织样本处理）
自备试剂
蒸馏水/去离子水
生理盐水（0.85% NaCl）
3%磺基水杨酸（用于去除蛋白干扰）
抗凝剂（肝素/EDTA，仅用于血浆样本）
样本前处理方法
动植物组织样本取新鲜组织，用生理盐水冲洗干净，滤纸吸干水分称取0.1g组织，加入1mL预冷的5%磺基水杨酸（含1mmol/L EDTA），冰浴匀浆12000rpm 4℃离心10min，取上清液置冰上待测若样品浓度过高，可用5%磺基水杨酸稀释后测定
血清/血浆样本血清样本：血液凝固后3000g 4℃离心10min，取血清上清血浆样本：加入抗凝剂（肝素/EDTA）后3000g 4℃离心10min，取上清取0.5mL血清/血浆，加入0.5mL 10%磺基水杨酸，混匀后静置10min12000rpm 4℃离心10min，取上清液置冰上待测
细胞/细菌样本收集对数生长期细胞/细菌，8000g 4℃离心5min弃上清加入1mL预冷的5%磺基水杨酸（含1mmol/L EDTA），冰浴超声破碎（功率20%，超声3s/间隔10s，重复30次）12000rpm 4℃离心10min，取上清液置冰上待测
尿液样本取新鲜尿液，3000g 4℃离心10min，去除沉淀直接检测或用5%磺基水杨酸稀释后测定
测定操作步骤
比色法操作
试剂准备：
试剂一：5%磺基水杨酸（含1mmol/L EDTA），4℃保存
试剂二：缓冲液（0.2mol/L Tris-HCl，pH7.5，含5mmol/L EDTA），4℃保存
试剂三：NADPH溶液（10mmol/L），-20℃避光保存
试剂四：谷胱甘肽还原酶（GR，20U/mL），4℃保存
试剂五：DTNB溶液（10mmol/L），4℃避光保存
工作液：试剂二+试剂三+试剂四+试剂五，按体积比100:2:1:1混合，现配现用
标准曲线建立：
准备GSSG标准溶液（0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6μmol/L）
取比色皿，依次加入：工作液900μL + 标准液100μL
混匀，37℃水浴保温5min
测定412nm处吸光度值，绘制标准曲线
样本测定：
取比色皿，依次加入：工作液900μL + 样本100μL
混匀，37℃水浴保温5min
测定412nm处吸光度值，根据标准曲线计算GSSG含量
微量法（酶标仪）操作96孔板每孔加入：工作液90μL + 标准液/样本10μL37℃预温育5min，加入样本后立即混匀测定412nm处吸光度值，绘制标准曲线根据样本吸光度值，从标准曲线上计算GSSG含量
含量计算方法
单位定义
μmol/L：每升样本中GSSG的微摩尔数
μmol/g鲜重：每克组织鲜重中GSSG的微摩尔数
μmol/mgprot：每毫克蛋白中GSSG的微摩尔数
计算公式
GSSG含量(μmol/L)=C×V样总V样测×DGSSG含量(μmol/L)=C×V样测V样总×D
C：从标准曲线查得的GSSG浓度（μmol/L）
V样总：样本提取液总体积（mL）
V样测：测定时加入样本体积（mL）
D：样本稀释倍数（若未稀释则为1）
简化公式
组织样本：GSSG（μmol/g鲜重）= C × V样总 ÷ W
液体样本：GSSG（μmol/L）= C × D
蛋白样本：GSSG（μmol/mgprot）= C × V样总 ÷ Cpr
性能指标
指标 要求
线性范围 0~1.6μmol/L，线性相关系数r≥0.995
最低检测限 0.02μmol/L
回收率 90%~110%
批内精密度 CV≤5.0%
批间精密度 CV≤8.0%
稳定性 4℃保存12个月，活性保留≥90%
注意事项
样本处理：
样本需新鲜制备，避免氧化；-80℃可保存1个月
匀浆与离心需在冰浴中进行，控制温度在0-4℃
磺基水杨酸可去除蛋白干扰，提高检测准确性
试剂使用：
NADPH溶液对光敏感，配制后需避光保存
谷胱甘肽还原酶需4℃保存，避免失活
不同批号试剂不能混用，需重新绘制标准曲线
测定过程：
反应温度需严格控制在37℃，避免温度影响酶活性
若吸光度值超出线性范围，需稀释样本后重新测定
每个样本需设置平行实验，结果取平均值
质量控制：
每次实验需设置空白对照和质控样本
定期校准仪器，确保检测结果准确性
若结果偏差较大，需检查试剂是否变质或样本处理是否正确
公司正在出售的产品
基质细胞衍生因子1β检测试剂盒 SDF-1β ELISA Kit | G422小鼠脑神经胶质母细胞 |
人围脂滴蛋白1ELISA试剂盒 | 小鼠原代骨髓巨噬细胞 |
人血纤蛋白原降解产物ELISA试剂盒 | 小鼠骨髓巨噬细胞 |
人血小板反应蛋白4ELISA试剂盒 | 人肺癌细胞A-427(STR鉴定正确) |
人血小板活化因子ELISA试剂盒 | BIU-87 (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确) |
人血小板内皮细胞粘附分子1ELISA试剂盒 | 人肝动脉内皮细胞 |
人血小板相关抗体IgMELISA试剂盒 | 人肝动脉平滑肌细胞 |
人Tafazzin蛋白ELISA试剂盒 | 鸭脑微血管内皮细胞永生化 |
人血小板衍生生长因子ELISA试剂盒 | 大鼠雪旺细胞 |
人颗粒KELISA试剂盒 | SW839（人肾癌细胞） |
人循环免疫复合物ELISA试剂盒 | AAV-293人胚肾细胞 |
人酰胺腺嘌呤二核苷SUANELISA试剂盒 | A2058人黑色素瘤细胞专用培养基 |
人酰胺腺嘌呤二核苷SUAN磷SUANELISA试剂盒 | 氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量测试盒NCI-H716人结直肠腺癌细胞 |
人氧化低密度脂蛋白ELISA试剂盒 | 大鼠原代颌下腺上皮细胞 |
人氧化低密度脂蛋白抗体ELISA试剂盒 | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化)PC-12（种属鉴定） |
基质细胞衍生因子1β检测试剂盒 SDF-1β ELISA Kit | G422小鼠脑神经胶质母细胞 |
人围脂滴蛋白1ELISA试剂盒 | 小鼠原代骨髓巨噬细胞 |
人血纤蛋白原降解产物ELISA试剂盒 | 小鼠骨髓巨噬细胞 |
人血小板反应蛋白4ELISA试剂盒 | 人肺癌细胞A-427(STR鉴定正确) |
关键字： 氧化型谷胱甘肽;GSSG;测试盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！