产品介绍:
H5/H7 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测样本中H5和H7亚型禽流感病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒通常采用实时荧光RT-PCR技术,能够在一个反应体系中同时区分并检测H5和H7两种亚型。
产品名称 | H5/H7 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3021 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是双重荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术:
逆转录 (RT): 将样本中提取的病毒RNA逆转录成互补的DNA (cDNA)。
多重PCR扩增: 利用特异性的引物和探针组合,在同一反应管内同时扩增目标基因。
FAM荧光通道: 对应H5亚型的特异性检测(通常靶向HA基因)。
VIC/HEX荧光通道: 对应H7亚型的特异性检测(通常靶向HA基因)。
内标(Internal Control): 许多现代试剂盒会加入第三个荧光通道(如ROX),用于监控整个提取和扩增过程,防止假阴性。
结果判读逻辑:
H5阳性: 仅FAM通道出现特异性扩增曲线。
H7阳性: 仅VIC通道出现特异性扩增曲线。
混合感染: FAM和VIC通道均出现特异性扩增曲线。
阴性: 两个通道均无扩增(且内标正常)。
�� 典型性能参数
根据目前市面上同类产品(如针对H5/H7/H9的检测试剂盒)的技术标准,其参数通常如下:
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 H5-HA基因 / H7-HA基因 特异性识别血凝素基因
检测方法 荧光RT-PCR (探针法) TaqMan探针技术,特异性高
检测限 1×10³ ~ 1×10⁴ 拷贝/mL 最低可检测浓度
特异性 高 不与H1N1、H3N2、H9N2等其他流感亚型交叉反应
检测时间 约 1.5 - 2 小时 包含40-45个扩增循环
�� 样本类型
适用于多种临床和环境样本,主要包括:
临床样本: 咽拭子、鼻拭子、痰液、肺泡灌洗液。
禽类样本: 禽类咽喉拭子、泄殖腔拭子。
环境样本: 活禽市场笼具表面涂抹物、污水、清洗污水等。
�� 操作流程简述
样本采集与保存: 使用无菌采样拭子采集样本,置于病毒保存液中,4℃运送,长期保存需-70℃。
病毒RNA提取: 使用配套的病毒RNA提取试剂盒(如磁珠法或柱提法)提取核酸。
配置反应体系: 将提取的RNA、PCR反应液、酶、引物/探针混合液按比例加入PCR反应管。
上机检测: 将反应管放入实时荧光PCR仪,设置好荧光通道(FAM检测H5,VIC检测H7)。
结果分析: 根据仪器生成的扩增曲线和Ct值进行判读。
⚠️ 注意事项
生物安全: 禽流感病毒(尤其是H5/H7亚型)属于高致病性病原体。操作高浓度样本或病毒培养时,必须在生物安全三级(BSL-3)实验室进行;临床样本的核酸检测通常在加强型BSL-2实验室进行。
防污染: PCR检测极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区),防止扩增产物污染导致假阳性。
试剂保存: 试剂盒中的酶和探针通常需在-20℃避光保存,避免反复冻融。
临床意义: 检测结果仅为临床辅助诊断依据,不能作为最终确诊的唯一标准,需结合流行病学史、临床表现和其他检查结果综合判断。
公司正在出售的产品:
PE-Cy5标记人CD25单克隆抗体 | BCAS4 乳腺癌扩增序列蛋白4抗体 |
结核分枝杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体 | 瞬时受体电位通道蛋白4抗体 |
PTD016 PTD016蛋白抗体 | Peroxiredoxin 1 过氧化还原酶1单克隆抗体 |
磷酸化GATA结合蛋白3抗体 | 大鼠ERp57 核酸检测试剂盒 |
TBC1D12 TBC结构域家族D12蛋白抗体 | 人骨保护素(OPG)核酸检测试剂盒 |
PHYHIP 植烷酸氧化酶抗体 | 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)PCR检测试剂盒 |
Malectin蛋白抗体 | 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)核酸检测试剂盒 |
EBFP 增强型蓝色荧光蛋白单克隆抗体 | 大鼠降钙素(CT)核酸检测试剂盒 |
配对盒基因8抗体 | 小鼠E-钙粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)PCR检测试剂盒 |
PSME3 蛋白酶体激活因子PA28γ抗体 | 人CC趋化因子受体2(CCR2)PCR检测试剂盒 |
FAM212B蛋白抗体 | 鸭极低密度脂蛋白(VLDL)核酸检测试剂盒 |
ZNF263 锌指蛋白263抗体 | 大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)PCR检测试剂盒 |
16号染色体开放阅读框41抗体 | 兔p53(p53)PCR检测试剂盒 |
小鼠双肾上腺皮质激素(DCX)PCR检测试剂盒 | H5/H7 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒驴雌二醇(E2)PCR检测试剂盒 |
大鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)PCR检测试剂盒 | 小鼠催产素(OT)核酸检测试剂盒 |
人白色念珠菌(C.albicans)核酸检测试剂盒 | 猪胰岛素(INS)PCR检测试剂盒 |
注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
关键字: H5/H7 ;亚型禽流感病毒;检测试剂盒;
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