鹅疏螺旋体（鹅包柔氏螺旋体）染料法荧光定量PCR试剂盒

鹅疏螺旋体（鹅包柔氏螺旋体）染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于鹅疏螺旋体（鹅包柔氏螺旋体）的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作简便。

高特异性：引物针对鹅疏螺旋体保守序列设计，无交叉反应。

灵敏度高：可检测低至几百拷贝/反应的靶标。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

配套完整：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）及优化反应体系，支持50次20-40μL体系反应。

规格与成分

2×qPCR MagicMix：500 μL（预混荧光染料，含dNTPs、酶等）。

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（用于阳性对照梯度稀释）。

鹅疏螺旋体PCR引物混合物：100 μL（特异性引物）。

阳性对照：50 μL（1×10⁸拷贝/μL DNA片段）。

使用手册：1份。

运输与保存

运输条件：低温泡沫箱加冰密封运输。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

注意事项：阳性对照需单独存放，避免污染其他组分。

使用方法

样本准备：

自备DNA模板，建议浓度≥10 ng/μL。

阳性对照需按10倍梯度稀释（10²-10⁷拷贝/μL），独立操作以避免污染。

PCR反应体系（以20 μL为例）：

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：0.4 μL

DNA模板：2 μL

ROX校正染料（依机型需求添加）

补超纯水至20 μL。

PCR扩增程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 92℃ | 5分钟 |

| 循环反应（30次） | 94℃ | 60秒 |

| | 50℃ | 60秒 |

| | 72℃ | 60秒 |

| 信号采集 | 50℃或72℃（推荐） | 仪器默认设置 |

数据分析：

定量检测时，以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算待测样本浓度。

荧光信号采集波长：激发471 nm/发射530 nm（结合DNA后最大吸收500 nm）。

注意事项

实验需分区操作（样本制备、扩增、分析），避免交叉污染。

稀释阳性对照时需使用带滤芯枪头。

不同机型可能需优化循环参数或添加ROX染料。

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