检验原理
本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对唾液链球菌（Streptococcus salivarius）基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测。
产品名称
唾液链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Streptococcus salivarius Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4387
主要组分
qPCR预混液：含SYBR Green染料、DNA聚合酶、dNTPs及缓冲体系（即开即用）。
特异性引物：针对唾液链球菌靶基因优化的引物对。
阳性对照：已知浓度的唾液链球菌DNA片段（非活体样本，安全性高）。
阴性对照：无核酸酶水（用于污染监测）。
模板稀释液：用于标准品梯度稀释或样本预处理。
操作步骤
样本准备
口腔拭子样本：采集后置于无菌生理盐水中震荡洗脱，离心取上清提取DNA。
DNA提取建议：使用柱式法或磁珠法提取，确保OD260/280比值在1.7-2.0之间。
试剂配制
预混液解冻：-20℃取出后冰上缓慢解冻，轻弹混匀，短暂离心备用。
反应体系配置（20μL/反应）：
预混液：10μL
引物混合液：2μL
模板DNA：2μL（建议浓度≤100ng/μL）
无核酸酶水：补至20μL
PCR扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：
变性：95℃ 10秒
退火/延伸：60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃-95℃，每0.5℃递增，监测荧光变化。
数据分析
定性检测：熔解曲线单峰且Ct值≤35判为阳性。
定量检测：通过标准曲线计算拷贝数（线性范围：10²-10⁷拷贝/μL）。
注意事项
实验分区操作，避免气溶胶污染。
阳性对照需独立稀释，避免污染其他组分。
建议设置3次技术重复及阴性对照（NTC）。
储存及有效期
-20℃避光保存，有效期12个月。
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