睡眠嗜组织菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 睡眠嗜组织菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Histophilus somni Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4578 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green I荧光染料法，针对Histophilus somni基因组保守区域设计特异性引物，通过实时监测PCR扩增过程中的荧光信号，实现对目标核酸的定性和定量检测。荧光信号强度与模板浓度呈正相关，可通过标准曲线计算样本中病原体载量。
试剂组成
扩增液：50μL/管（含dNTPs、Mg²⁺等）
反应液：950μL/管（含缓冲体系、SYBR Green I、热启动酶）
阳性质控品：50μL/管（1×10⁸拷贝/μL，无传染性DNA片段）
阴性质控品：50μL/管（无核酸酶水）
说明书：1份
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等。
自备耗材与设备
无DNA/RNA酶的离心管（1.5mL、0.2mL PCR管）、滤芯吸头（10/200/1000μL）
离心机、振荡混合器、移液器
样品要求
样本类型：胃液分泌物、呕吐物、培养物等（参照《临床微生物样本采集规范》）。
保存条件：短期-20℃；长期-70℃（≤6个月），避免反复冻融。
运输：2~8℃冰袋运输。
使用方法
样本处理
按规范提取核酸，避免交叉污染。
标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL为例）：
梯度稀释阳性质控品（10倍稀释），独立操作防止污染。
PCR反应体系配制：
反应液18μL + 模板2μL（样本/对照），混匀离心。
扩增程序：
预变性：95℃ 5min → 循环阶段（95℃ 10s，60℃ 30s，40 cycles）→ 熔解曲线分析。
注意事项
不同批号组分不可混用。
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区）。
仅限科研用途，非临床诊断依据。
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