牛诺如病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，专用于牛诺如病毒（Bovine Norovirus）RNA的高灵敏度、高特异性荧光定量RT-PCR检测。采用一步法技术，将反转录与定量PCR整合于同一反应体系，减少操作步骤，降低污染风险。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量定量分析。

检测原理

反转录阶段：耐热逆转录酶高效合成cDNA。

定量扩增阶段：HotStart Taq DNA聚合酶在优化缓冲体系中扩增靶标，SYBR Green I染料嵌入双链DNA后释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量。

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T） | 规格（200 T） |

| A | 2×荧光定量预混缓冲液 | 250 μL | 2×1.25 mL |

| B | 逆转录-聚合酶混合酶 | 20 μL | 200 μL |

| C | RNase-free H₂O | 250 μL | 2×1.25 mL |

| D | 牛诺如病毒阳性对照（非传染性）| 50 μL | 50 μL |

性能参数

灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或10²拷贝/μL。

线性范围：10²~10⁷拷贝/μL（R²≥0.99）。

重复性：CV值＜5%（高、中、低浓度模板）。

特异性：引物针对牛诺如病毒保守区设计，无交叉反应。

操作步骤

样本处理：提取待测RNA，避免降解。

反应体系配制（20 μL体系）：

2×预混缓冲液 10 μL

酶混合液 1 μL

引物各0.4 μM

RNA模板 2 μL

RNase-free H₂O补至20 μL。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 5分钟 → 扩增（40循环）：95℃ 10秒，60℃ 30秒（采集荧光）。

数据分析：通过标准曲线计算样本病毒载量。

注意事项

阳性对照需单独操作，避免污染。

预混液解冻后需涡旋混匀，避免反复冻融。

实验需在符合生物安全要求的实验室进行。

储存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：冰袋低温运输。

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