检验原理

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术,针对绵羊副流感病毒3型基因组保守区域设计特异性引物,通过实时荧光监测扩增过程,实现对病毒核酸的定性或定量检测。
产品名称 | 绵羊副流感病毒3型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Ovine Parainfluenza Virus Type 3 Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4446 |

主要组分

| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | OPIV3扩增预混液(含酶、dNTPs等) | 50μL×1管 |
| 试剂二 | OPIV3荧光反应液(含SYBR Green染料) | 950μL×1管 |
| 试剂三 | OPIV3阳性质控品(1×10^4 copies/μL) | 50μL×1管 |
| 试剂四 | OPIV3阴性质控品(无核酸水) | 50μL×1管 |
| —— | 说明书 | 1份 |
注:
不同批号组分不可混用,避免反复冻融(≤5次)。
需自备器材:无核酸酶离心管、滤芯吸头(10/200/1000μL)、离心机、移液器等。
储存与运输
储存条件:-15℃以下避光保存,有效期12个月。
运输要求:泡沫盒加冰袋密封运输,温度≤8℃。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪(如ABI系列、Bio-Rad CFX、Roche LightCycler等)。
操作步骤

样本处理
采集组织、血液或病毒样本(1g),避免交叉污染。
短期保存于-20℃,长期需-70℃(≤6个月)。
核酸提取
使用配套或等效DNA/RNA提取试剂,提取后立即检测或-20℃暂存。
试剂配制与加样
反应液避光解冻,短暂离心混匀。
按比例配制反应体系(详见说明书附表),避免气泡。
PCR扩增
程序设置:逆转录(50℃ 15min)→预变性(95℃ 5min)→40循环(95℃ 10s→60℃ 30s,荧光采集)。
结果分析
定量检测需以阳性质控品建立标准曲线(Ct值-log浓度),推算待测样本浓度。
注意事项

严格分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区),穿戴专用防护用具。
实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及器材。
阴性/阳性对照需同步检测,确保结果有效性。
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关键字: 绵羊副流感病毒3型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;