猪类圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Strongyloides ransomi Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4593
用途:科研检测(定性及定量分析)
检测方法:染料法荧光定量PCR
适用样本:纯化后的DNA模板
产品性能
检测范围:
定性检测:可特异性扩增猪类圆线虫目标序列。
定量检测:线性范围达5个数量级(示例:10²–10⁷拷贝/μL)。
灵敏度与特异性:
引物经优化设计,仅靶向猪类圆线虫DNA,无交叉反应。
提供无传染性阳性对照(DNA片段),避免假阴性干扰。
反应体系:
50次20μL体系反应(需自备样品DNA)。
试剂盒组成
(具体组分以实际包装说明书为准)
PCR反应液:含预混染料、dNTPs、聚合酶等。
阳性对照:1×10⁸拷贝/μL标准DNA片段。
模板稀释液:用于标准曲线制备。
使用手册:含操作流程及注意事项。
操作步骤
1. 标准曲线制备(10倍梯度稀释)
注意事项:
稀释操作需在独立区域进行,避免污染。
使用带滤芯枪头。
步骤:
① 标记6管(7–2号),每管加45 μL稀释液。
② 7号管:加5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀,得1×10⁷拷贝/μL标准品。
③ 依次梯度稀释至2号管(1×10²拷贝/μL),冰上保存备用。
2. 样品DNA制备
推荐使用兼容性核酸纯化试剂提取样本DNA。
设置阴性/阳性对照(N+2个样本)。
3. qPCR反应设置
反应体系:20μL/管(含模板DNA、引物、PCR Mix)。
程序设置:按说明书推荐循环条件运行(预变性→扩增→荧光采集)。
注意事项
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
安全提示:
阳性对照为DNA片段,无生物危害,但仍需规范操作。
废弃组分需按实验室规范处理。
适用范围:仅限科研,不适用于临床诊断。
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