兔食管平滑肌细胞 新品

兔食管平滑肌细胞

细胞简介 ：

兔食管平滑肌分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

 产品信息：

产品名称 兔食管平滑肌细胞

英文名称 Rabbit Esophageal Smooth Muscle Cells

组织来源 食管

默认种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔食管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介 实验室分离的兔食管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测 实验室分离的兔食管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

原代细胞培养（Primary Culture）是指从机体中直接取出组织或器官，通过酶消化或机械方法分散成单个细胞或组织块，

在体外模拟体内环境进行首次培养的过程。由于原代细胞刚从活体组织分离，其生物学特性、

遗传背景和功能状态最接近体内真实情况，因此在药物筛选、毒理学研究、疾病机制探索和病毒学等领域具有不可替代的价值。

核心特点

高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。

有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。

异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。

操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。

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细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

换液频率：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

冻存液：使用无血清冻存液。

冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-114℃，最终转入液氮长期保存。