广州卢卡科技 NPTII基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)| 转基因标记基因筛选专用
市场价:1880元/盒 | 13年供货企业 | GMP车间生产 | 厂家直供 现货速发
1、产品简介
本试剂盒采用PCR-荧光探针法(TaqMan探针法),专为NPTII基因(新霉素磷酸转移酶II基因,Neomycin Phosphotransferase II gene)检测设计。NPTII基因源自大肠杆菌转座子Tn5,编码新霉素磷酸转移酶,可赋予宿主对卡那霉素、新霉素等氨基糖苷类抗生素的抗性,是目前转基因载体构建中应用最广泛的筛选标记基因之一,几乎存在于各类转基因作物(玉米、大豆、棉花、水稻、烟草等)、转基因微生物的表达载体中,用于筛选成功整合外源目的基因的阳性转化体,是转基因成分通用筛查、转基因载体验证的核心靶标之一。该基因作为转基因载体的关键筛选元件,可快速区分阳性转化体与阴性个体,大幅提升转基因育种、载体构建的效率,解决了转基因筛选中难以快速鉴定阳性株的痛点,尤其适用于难以建立酶联免疫检测的转基因成分筛查场景。试剂盒可精准定性检测各类植物样本、食品、饲料、转基因载体中的NPTII基因成分,有效区分含该标记基因的转基因样本与非转基因样本,无交叉反应,可精准区分NPTII基因与植物内源基因、其他抗性标记基因(如HPT潮霉素磷酸转移酶基因),是转基因成分通用筛查、科研实验、合规检测的核心工具。试剂盒参照《GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测实时荧光定性 聚合酶链式反应(PCR)检测方法》
和《SN/T 1204-2016 植物及其加工产品中转基因成分 实时荧光 PCR 定性检验方法》等标准开发,检出限为 0.01%,用于 NPTII 基因
成分的检测,适配科研实验、农产品检测、食品饲料筛查、进出口检验检疫等多场景,由广州卢卡科技出品,品质可控,适配批量检测与合规检验需求,专为丁香通科研、检测领域用户定制优化,同时可与CaMV35S启动子、tNOS终止子等其他转基因元件检测试剂盒搭配使用,构建完整的转基因筛查体系,也可与Cry1A(b)、CP4-EPSPS等基因检测试剂盒搭配,实现转基因作物多性状同步筛查与阳性株验证。
2、规格参数
核心规格:48T 0.1PCR管 48T 0.2PCR管 48T 非一管式(可按需定制)
组份名称 | 含量规格 |
A-NPTII-P | 20μL×8 管×6 排 |
NG-P(阴性对照) | 100μL×2 支 |
PG-NPTII-P(阳性对照) | 100μL×1 支 |
3、适用范围
适用样品:各类转基因植物样本(玉米、大豆、棉花、水稻、烟草、小麦、蔬菜等植株、叶片、根系、种子)、植物加工制品(植物提取物、大豆油、玉米淀粉、小麦粉、饲料、加工食品、初榨植物油等)、转基因植物育种材料、科研用植物样本及转基因载体样本(质粒、农杆菌载体等),可适配深加工植物产品(如抛光精米、玉米糊精、大豆蛋白、烟草提取物等)中微量NPTII基因的检测需求,精准筛查含该标记基因的转基因成分,适配几乎所有商业化转基因作物及转基因载体检测场景,尤其适用于转基因载体构建验证、转基因作物阳性株筛选,可有效检测低含量深加工样品及微量载体样本中的目标基因,解决同类产品假阴性、假阳性问题,适配转基因筛选相关实验场景。
适用仪器:兼容主流实时荧光定量PCR仪,如:Gentier系列、ABI 7500/7500Fast、LineGene 9600/9660、Bio-Rad CFX 96、Agilent Mx3005P、Roche 480等,无需额外调试,直接适配使用,适配科研实验室、检测机构常用仪器型号,无需额外适配调试,可直接融入现有检测流程,同时兼容部分恒温荧光检测仪,适配不同实验室设备需求,满足常规检测与快速筛查双重需求,可配合转基因检测相关标准要求使用,确保检测结果精准可靠。
适用场景:科研实验(转基因植物验证、转基因载体构建检测、NPTII标记基因表达调控研究、转基因成分快检技术研发、转基因作物育种阳性株筛选、转基因载体功能验证相关研究)、农产品转基因筛选检测、食品饲料转基因成分筛查、进出口植物及制品检验检疫、农业转基因生物安全评价等,是含NPTII基因转基因成分通用筛选的核心试剂盒,可快速排查样品中是否含有转基因标记基因相关成分,为后续品系特异性检测、阳性株鉴定提供基础,同时可用于转基因作物田间快速筛查与安全评价,助力转基因作物产业化推广与监管,适配转基因载体筛选与验证相关实验场景,尤其适用于难以建立酶联免疫检测的转基因成分筛查场景。
4、检测原理
基于特异性引物探针双重特异性识别NPTII基因的保守序列,采用实时荧光定量PCR技术,针对该基因保守序列设计特异性引物与荧光标记探针(探针两端标记荧光基团与淬灭基团),在PCR扩增过程中,当探针与目标DNA序列结合后,聚合酶在延伸时会降解探针,释放出荧光信号,通过PCR扩增过程中荧光信号的实时变化判定结果。该方法特异性强,无交叉反应,可精准区分NPTII基因与植物内源基因、其他抗性标记基因(如HPT潮霉素磷酸转移酶基因)及动物、微生物基因,不与非转基因植物样本发生交叉反应,可有效检测样品中转基因相关的NPTII基因序列,快速判断样品是否含有含该标记基因的转基因成分或阳性载体,确保检测结果精准可追溯,符合合规检测与科研实验要求,是目前国内外转基因检测标准中推荐的主流筛选方法,检测准确性经过大量样本验证,假阴性率≤1%、假阳性率≤5%,可适配低浓度目标基因检测需求,最低检测限可达100 copies/μL水平,适配转基因载体微量样本检测需求。
5、核心优势
✅ 高灵敏:检出限低至0.01%/0.1ng/μL,可精准检测深加工植物产品(如抛光精米、玉米淀粉、大豆蛋白)及微量转基因载体样本中微量NPTII基因成分,避免漏检,适配低含量转基因成分及微量载体筛查场景,满足科研与检测的高灵敏度需求,最低可检测1×10³ copies/mL的目标基因,优于常规检测标准极限值,可有效检出样本中微量的转基因标记基因成分,灵敏度≥99%,可适配低浓度、高干扰样品及微量载体样本检测。
✅ 高特异:特异性≥98%,针对NPTII基因保守序列设计,无交叉反应,不与非转基因植物、动物、微生物核酸发生反应,可精准区分NPTII基因与HPT等其他抗性标记基因、植物内源基因及其他转基因元件,特异性突出,结果可靠,适配科研实验的严谨性与检测的合规性要求,有效避免因抗性基因序列同源性导致的假阳性结果,特异性符合相关标准要求,经大规模样本验证无交叉干扰,适配标记基因特异性筛查需求。
✅ 转基因标记基因专用:专为NPTII基因(卡那霉素抗性标记基因)检测设计,是转基因载体构建、转基因作物阳性株筛选的核心工具,可快速排查样品中是否含有含该标记基因的转基因成分或阳性载体,广泛应用于各类转基因相关检测与科研实验,适配国标转基因筛选要求,可与CaMV35S启动子、tNOS终止子等其他转基因元件检测试剂盒搭配使用,构建完整的转基因筛查体系,也可与Cry1A(b)、CP4-EPSPS等基因检测试剂盒搭配,实现转基因作物多性状同步筛查与阳性株验证,适配难以建立酶联免疫检测的场景需求。
✅ 快出结果:30–60分钟完成检测,无需PCR后处理,避免使用EB等有害物质,减少对实验人员的伤害,高效赋能科研实验与批量检测,提升实验与检测效率,适配高通量检测需求,与快速检测技术研发场景适配,整个检测流程(从DNA提取到结果判读)可在2-3小时内完成,大幅缩短检测周期,适配田间快速筛查与实验室常规检测双重场景,适配转基因载体快速筛选需求。
✅ 易操作:预混体系设计,一管一用,即开即用,用户只需提供DNA样品,减少实验操作步骤,降低污染风险,新手也能快速上手,适配科研实验室、检测机构日常操作需求,可搭配各类核酸提取试剂盒使用,也可适配简易核酸粗提样本及微量载体样本检测,适配不同检测场景需求,同时可参照标准方法优化样品处理流程,提升检测便利性,适配深加工样品及微量载体样本检测的特殊需求。
✅ 合规稳定:GMP车间生产,批次稳定,符合国家转基因检测相关标准(GB/T 19495.4-2018、农业农村部公告第864号),超100万份植物及转基因载体相关样本验证,实际准确率≥98%,结果可追溯、可信赖,适配合规报告出具与科研数据留存,低温运输,-20℃避光保存,保质期12个月,稳定性强,避免反复冻融影响检测性能,不同批号试剂性能稳定一致,可满足长期科研与检测使用需求,适配转基因检测合规要求。
✅ 厂家直供:广州卢卡科技直接供货,无中间商,性价比高,现货速发,支持批量采购与定制化规格,适配丁香通科研、检测用户长期采购需求,提供完善的售后技术支持,助力科研实验与合规检测顺利开展,同时可提供技术培训与方案优化建议,协助解决实验过程中的各类问题,尤其可提供转基因载体检测、阳性株筛选相关的优化方案。
6、储存条件与保质期
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融(≤5次),试剂使用前需完全解冻,充分颠倒混匀后短暂离心,推荐按检测频次将反应液分管保存,反应液中的荧光探针成分对光敏感,需严格避光操作,防止荧光衰减影响检测结果;DNA模板(尤其转基因载体样本)需妥善保存,避免核酸降解,试剂配制和加样等步骤建议在冰盒上操作,保障试剂活性,尤其注意阳性对照的妥善保存,避免污染,适配微量载体样本的储存与检测要求。
保质期:-20℃避光密封保存,保质期12个月,不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用,运输过程需低温冷藏,确保试剂活性,避免运输过程中冻融影响检测性能,保障检测结果稳定性;阳性对照、阴性对照需单独妥善保存,避免污染,其中阳性对照浓度较高,需单独存放并避免污染其他试剂,确保检测结果的准确性,可配合转基因载体样本长期使用。
7、结果判定(清晰易懂,适配科研/检测场景)
阳性:出现典型 S 型扩增曲线 → 样品中含有NPTII基因成分,说明样品可能含有含该标记基因的转基因成分或阳性转基因载体,可用于后续转基因品系特异性检测、阳性株鉴定或科研实验结果判定,Ct值通常在15~35之间为正常阳性扩增范围(具体可按仪器阈值调整),Ct值≤35可判定为阳性,低浓度阳性样本及微量载体样本可结合测序进一步验证。
阴性:无扩增曲线或 Ct 值高于阈值 → 样品中不含NPTII基因成分,说明样品未含有含该标记基因的转基因成分或阳性载体,或样品核酸提取失败、PCR扩增体系异常,需重新处理样品并进行检测,Ct值≥40或无Ct值可判定为阴性,避免假阴性结果影响实验与检测结论;35<Ct值≤40时,需重复实验或增加DNA浓度确认,尤其针对深加工低浓度样本及微量载体样本需多次验证。
无效:阳性对照未出现扩增曲线,或阴性对照出现扩增曲线 → 实验结果无效,需排查污染或试剂失效问题后重新检测,确保实验流程合规、结果可靠;建议每次检测设置空白对照,进一步排除污染干扰,同时需排查是否因PCR抑制剂残留导致检测结果异常,尤其注意深加工样品及微量载体样本中的干扰物质影响,适配标记基因检测的严谨性要求。