人睾丸支持细胞永生化细胞专用培养基 新品

人睾丸支持细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

人睾丸支持细胞永生化细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持人睾丸支持细胞永生化细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含人睾丸支持细胞永生化细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于人睾丸支持细胞永生化细胞的培养。

支持细胞培养体系     500 ml

产品主要成分

原代支持细胞基础培养基         440 ml

原代支持细胞培养添加剂          5 ml

特级胎牛血清        50 ml

P/S青霉素-链霉素           5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM/F12培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及卵泡刺激素（FSH），模拟人睾丸支持永生化细胞的生理环境。培养基中的营养成分和激素可支持细胞增殖并维持其支持功能（如精子发生的营养供应、免疫豁免），用于男性不育症、睾丸肿瘤等疾病的研究及药物筛选。
使用方法：

（一）常规使用步骤

培养基从 2~8℃取出，37℃水浴预热 15~20min，避免冷刺激细胞。

超净台内用 75% 酒精擦拭培养基瓶身，无菌操作开封。

吸弃培养瓶中旧培养基，加入预热的专用培养基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。

置于37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱培养。

（二）细胞复苏

液氮取出冻存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后转入超净台。

细胞悬液转移至含 5mL 预热专用培养基的 15mL 离心管，1000rpm（200g）离心 3min，弃上清。

加 5mL 专用培养基重悬，转入 T25 培养瓶，37℃培养，次日换液去除死细胞。

（三）细胞传代（80~90% 汇合度）

吸弃旧培养基，无菌 PBS（无 Ca²⁺/Mg²⁺）洗细胞 1~2 次，吸弃 PBS。

T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，显微镜下见细胞变圆、间隙增大即终止。

加 3~4mL 专用培养基终止消化，轻柔吹打至单细胞悬液，1000rpm 离心 3min，弃上清。

专用培养基重悬，按1:3~1:4分瓶，补足培养基后 37℃培养。

（四）细胞冻存

传代步骤收集细胞，离心弃上清。

冻存液（90%FBS+10%DMSO）重悬，密度1~3×10⁶细胞 / 管。

分装入冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转入液氮长期保存。
注意事项：

所有操作严格遵循无菌规范，避免细胞交叉污染，每次操作仅处理一株细胞

培养基开封后尽快使用，避免长时间暴露于室温，未用完部分2-8℃避光保存

细胞培养过程中，定期显微镜观察细胞状态，及时更换培养基或传代，一般2-3天更换一次培养基

实验产生的废弃培养基、细胞悬液等生物废弃物，按规定进行消毒处理后再排放

若使用预配置完全培养基，无需额外添加血清、双抗等成分，直接使用即可
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