羊睾丸间质细胞永生化细胞专用培养基

羊睾丸间质细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

羊睾丸间质细胞永生化 细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持 羊睾丸间质细胞永生化 细胞 最佳的生长状态。

本产品中已包含 羊睾丸间质细胞永生化 细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于 羊睾丸间质细胞永生化 细胞的培养。

间质细胞培养体系   500 ml

产品主要成分

间质细胞基础培养基     440 ml

间质细胞培养添加剂     5 ml

特级胎牛血清    50 ml

P/S青霉素-链霉素        5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM/F12培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及黄体生成素（LH），模拟羊睾丸间质永生化细胞的睾丸微环境。培养基中的营养成分和激素可支持细胞增殖并维持其睾丸间质细胞功能（如睾酮合成、精子发生支持），用于羊生殖系统疾病的研究及药物筛选。
准备工作：

1. 试剂与材料

细胞专用培养基（包含基础培养基、生长添加剂、特级胎牛血清、双抗）

不含钙、镁离子的PBS缓冲液

0.25%Trypsin-0.02%EDTA消化液

无血清细胞冻存液

T25培养瓶、6cm培养皿、无菌离心管、移液枪及枪头等无菌耗材

2. 仪器设备

37℃、5%CO₂培养箱

低温离心机

-80℃超低温冰箱

液氮罐

倒置显微镜

超净工作台

培养基配制：

在超净工作台中，将500ml基础培养基倒入无菌容器中。

依次加入5ml上皮细胞生长添加剂、10ml特级胎牛血清和5ml双抗（青霉素/链霉素），轻轻摇晃容器使其充分混合均匀。

用0.22μm孔径的无菌滤膜对混合后的培养基进行过滤除菌，然后转移至无菌培养基瓶中备用。
性能检测与验证方法：

1. 无菌与内毒素检测

无菌检测：将培养基接种于细菌/真菌培养基，37℃培养14天，观察是否有菌落生长

内毒素检测：采用鲎试剂法或动态浊度法，定量检测培养基中内毒素含量

2. 细胞培养验证

细胞生长曲线：接种相同数量细胞，每天计数细胞数量，绘制生长曲线，评估培养基对细胞增殖的促进作用

形态学观察：定期用显微镜观察细胞形态，判断是否保持正常生长状态

标志物检测：通过免疫荧光、流式细胞术等方法检测细胞特异性标志物表达情况

功能实验：针对不同细胞类型设计特定功能实验，如内皮细胞血管形成实验、T细胞杀伤实验等
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