细胞简介:

髓核是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。
髓核细胞的过早衰老与凋亡是导致椎间盘退行性变过程的主要原因之一,主要表现为退变椎间盘内髓核细胞功能降低和数量减少,使得其 Ⅱ型胶蛋白聚糖等基质分泌量下降,终导致椎间盘维持脊柱高度、承受各方应力等生物力学功能丧失。
细胞特性:

1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。
2)细胞鉴定:Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
小鼠髓核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态
产品信息:

产品名称 | 小鼠髓核细胞 | 组织来源 | 椎间盘组织 |
英文名称 | Mouse primary nucleus pulposus cells | 货号 | A01X1899 |
细胞培养操作:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
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核心特点:
高度生理相关性:保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命:与无限增殖的肿瘤细胞系不同,原代细胞增殖能力有限,经过一定次数的分裂后会进入衰老期,这更符合正常细胞的生理状态。
异质性:初始培养物通常是多种细胞类型的混合物,有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高:对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格,培养难度大于永生化细胞系。
关键字: 小鼠髓核细胞;椎间盘组织;贴壁;
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