人神经酰胺激酶(CERK)重组蛋白适用于神经酰胺磷酸化酶活检测、鞘脂信号调控、细胞凋亡、炎症及肿瘤增殖体外功能验证实验。
型号:YS-DB1721
产品名称:人神经酰胺激酶(CERK)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Ceramide Kinase (CERK)
LK4; hCERK; Lipid kinase 4; Acylsphingosine kinase
酶与激酶
代谢通路
神经科学
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞质
预测分子量:19.7kDa
实际分子量:22kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser128~Ser278 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

鞘脂磷酸化催化机制:CERK 以 ATP 为磷酸供体,将磷酸基团转移至神经酰胺羟基,生成神经酰胺 - 1 - 磷酸。
HPLC 分离鞘脂产物定量:色谱分离神经酰胺底物与磷酸化产物,外标法计算转化率,测定 CERK 酶活。
免疫印迹重组蛋白鉴定:CERK 特异性抗体验证蛋白完整表达、纯度达标。
脂质底物特异性对照:仅神经酰胺可作为磷酸化底物,其他鞘脂无反应,证明 CERK 催化专一性。
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使用操作指南:

复溶操作
原核表达冻干粉:用无菌超纯水或指定缓冲液复溶,100μg蛋白加入86μL溶剂,轻轻摇晃或用移液枪轻吹溶解,禁止涡旋振荡。
真核表达溶液态:直接取用,如需稀释需使用匹配的缓冲液,避免剧烈操作。
储存条件
未复溶冻干粉:-20℃或-80℃保存,避免反复冻融,有效期通常为1-2年。
复溶后溶液:分装成单次使用量,-20℃或-80℃保存,避免多次冻融,有效期建议为1-3个月。
常见问题处理
标签影响功能:若用于蛋白功能或药物研究,优先选择无标签蛋白,或与去标签版本做对照实验。
批间差异:使用前核对CoA(分析证书),必要时进行批次间活性、纯度对比验证。
内毒素干扰:细胞实验前采用内毒素去除试剂盒处理,或直接选择低内毒素级别的产品。
关键字: 人神经酰胺激酶;CERK;重组蛋白;
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